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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海蒂科生物
- 检测范围:
ELISA
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
ELISA
- 标记物:
用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本
- 样本:
用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本
- 规格:
48T/96T
【详细描述】:
中文名称:人Nectin-4 ELISA
英文名称:Human Nectin-4 Quantikine ELISA Kit
货号:AL-H11351
规格:48T/96T
包装:T25培养瓶
品牌:ALWS
储存温度::-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)
有效期:6个月
产品供应商:上海慧颖生物科技有限公司
1-2个工作日发货,提供免费代测服务,收到标本起一周内提供原始数据和最终数据
ELISA各种样本收集、处理、保存方法
1.血清标本收集、处理、保存方法:
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,全血标本室温放置1-2h或4℃过夜,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
2.血浆标本收集、处理、保存方法:
根据样本要求选择EDTA或肝素钠或枸缘酸钠作为抗凝剂,用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,室温混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清即为血浆。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
3.尿液标本收集、处理、保存方法:
用干净容器收集尿液,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
4.唾液标本收集、处理、保存方法:
用干净离心管收集唾液,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
5.细胞标本收集、处理、保存方法:
(1)细胞培养上清
取细胞培养上清到干净离心管中,4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
(2)细胞裂解液
收集细胞培养液,4℃、3000rpm/min离心20min,弃去上清,用预冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通过反复冻融,使细胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min离心20min,除去细胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
6.植物标本收集、处理、保存方法:
取适量大小组织块(一般0.2-0.5g),用预冷的PBS缓冲液(0.01M,PH7.4)漂洗三次,滤纸拭干水分。准确称重,放入匀浆管中,加入4倍体积的匀浆介质(0.05mol/LTris-HCl,pH7.4PBS缓冲液)于匀浆管中,冰水浴条件下,剪碎组织块,手工匀浆或机器匀浆,制成匀浆液。4℃、10000rpm/min离心20min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
7.粪便标本收集、处理、保存方法:
采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中,向离心管中加入适量PBS缓冲液(0.01M,PH7.4),搅拌均匀。然后4℃、10000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
8.组织标本收集、处理、保存方法:
将组织样本用PBS缓冲液(0.01M,PH7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。将组织块称重,记录后剪碎(碎块尽量小)。将组织按一定的比例(通常组织重量:PBS体积=1:9)加入预冷的PBS缓冲液(临用前加入蛋白酶抑制剂)中匀浆,匀浆时置于冰上。吸取匀浆液到离心管中,4℃、10000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。
人Nectin-4 ELISA
1.ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
试剂盒通常能够在短时间内完成检测,提高试验效率,并且具有高敏感性,能够检测到非常低的浓度目标物质。此外,试剂盒具有良好的特异性,能够区分目标物质与非目标物质,减少误报结果的可能性。经过严格的质量控制和验证,试剂盒能够提供精确、可靠的检测结果,具有广泛的线性范围和良好的重复性。
具体来说,试剂盒的优点包括:
高效性:能够在短时间内完成检测,提高试验效率。
敏感性:能够检测到非常低的浓度目标物质。
特异性:具有良好的特异性,能够区分目标物质与其他类似物质。
准确性:经过严格的质量控制和验证,提供精确、可靠的检测结果。
重复性:具有良好的重复性,确保实验结果的稳定性。
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文献和实验ELISA 实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书,可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。 1. 检查试剂盒的保质期,保证所有试剂按说明书上的建议正确保存; 2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象,如沉淀或变色等; 3. 底物溶液应为无色; 4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液(样品、标准品及其他试剂)时,及时更换枪头,避免交叉污染; 5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致; 6. 盒中试剂不能
作为 ELISA 的最后一步,检测结果的计算对整个实验十分重要。 以夹心法为例。 1. ELISA 的样本通常要设置 1~2 个复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的 20%。 2. 样本的 OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度为 0 时的 OD 平均值。 3. 建立标准曲线 在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线(X 轴上为标准品浓度,Y 轴为对应的 OD 值)。推荐使用 origin 软件。 详细步骤如下: 第一步: 输入 OD 值
一、ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中
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