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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
31
- 英文名：
Soaking and Activation Buffer for PVDF Membrane
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250ml
英文名称：Soaking and Activation Buffer for PVDF Membrane
产品规格：250ml
发货周期：1～3天
本品是一种绿色环保、无毒无害的用于快速浸润和活化PVDF膜的溶液，并且浸润活化后的后续处理非常便捷。一个包装的本产品可以用于约75-100张常规尺寸PVDF膜(约6.6×8.5cm)的浸润和活化。
本产品安全无毒，不含剧毒的甲醇或其它的有毒有害试剂，只需数秒时间就可以把疏水的PVDF膜充分浸润和活化。并且浸润活化后的PVDF膜只需简单地用转膜液洗涤数秒，即可被转膜液快速平衡并用于后续的转膜等实验。
PVDF膜是westernblot实验中最广泛使用的转移介质之一，由于其在蛋白质截留能力、机械强度和化学相容性上都具有优越的性能而被广泛使用。PVDF膜适用于化学发光(如ECLStar、ECLPlus、ECL等)、常规显色(如DAB、TMB)、染色、同位素等方法检测蛋白。常见的PVDF膜孔径有0.45μm和0.2μm两种，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截和吸附作用，背景可能会比前者微高。
PVDF膜是疏水性的且不带电荷，不能被常规的转膜液所浸润，所以需要在使用前进行预处理以浸润和活化。最常见的方法是使用剧毒的甲醇浸润和活化PVDF膜，使PVDF膜中微孔内的空气被低表面张力的甲醇所替代，从而易于后续水或者缓冲液进入PVDF膜中的微孔内，使PVDF膜从疏水性变成亲水性，此时白色的PVDF膜会变成半透明状。通常情况，浸润活化后的PVDF膜还需要在转膜液中适当平衡2-3次，以充分去除膜上的甲醇并确保转膜时的均一性，才能用于后续的转膜等实验。
我公司的PVDF膜浸润活化液采用了优化的特殊配方，含有能产生特殊表面张力的无毒去垢剂，在确保安全无毒情况下，又能实现PVDF膜的快速浸润和活化，并且后续也极易被转膜液所平衡，是PVDF膜浸润活化的理想选择。
注意事项
1.本产品含有挥发性成分，使用完毕后请盖紧瓶盖，以防失效。
2.PVDF膜应使用镊子轻轻夹住边角，以免划痕损坏PVDF膜。
3.PVDF膜一经浸润和活化，需保持湿润，可放置于western转膜液或洗涤液中。如不慎被干燥，则需要重新浸润和活化。
储存条件4℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．PVDF膜活化浸润液哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
Tropine3thiol hydrochloride3908266488
Ononin芒柄花苷486624
2THENOYLACETONITRILE2酰33898907
5Cyanophthalide5酞82104743
(BROMOMETHYL)TRIPHENYLPHOSPHONIUM BROMIDE(溴)三溴鏻1034497
SUCCINYL COENZYME A SODIUM SALT琥珀酰辅酶A108347973
SCHIZANDRIN B五味子素61281376
1,3,5Tris(bromomethyl)benzene均三溴苄18226421
5ACETYL2NORBORNENE2酰5降1155328
1,2,4,5Benzenetetracarboxylic anhydride均四89327
benzo[1,2b:3,4b']dipyran9ylester, (2Z)白花前胡素73069279
(+)FANGCHINOLINE汉防素436771
CHLOROMETHYL THIOCYANATE3268799
ADONITOL侧金盏花488813
PERFLUORO(METHYLCYCLOHEXANE)全环355022
Ethidium Bromide(EB) 含量：暂不提供 规格：50次，100次
二 含量：暂不提供 规格：50次，100次
Ethylene glycol 含量：暂不提供 规格：50次，100次
埃文斯蓝 含量：暂不提供 规格：50次，100次
Evans Blue 含量：暂不提供 规格：15次，30次
固蓝B 含量：暂不提供 规格：50次，100次
Fast Blue B Salt 含量：暂不提供 规格：50次，100次
固蓝BB 含量：暂不提供 规格：50次，100次
PVDF膜活化浸润液哪家好GPRIN1G蛋白调节诱导神经突增生蛋白1抗体大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒67915315
GPRIN2G蛋白调节诱导神经突增生蛋白2抗体大鼠化蛋白激酶C(PPKC)ELISA试剂盒50679088
GPRIN3G蛋白调节诱导神经突增生蛋白3抗体大鼠化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒76815606
DIRC2干扰肾细胞癌蛋白2抗体大鼠组织蛋白酶K(cathK)ELISA试剂盒
p400p400蛋白抗体大鼠巨噬细胞替代激活相关化学子1(AmAC1)ELISA试剂盒201256
DNAJC7DNAJC7蛋白抗体大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒968934
VAV1鸟苷转换子VAV1抗体大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒58220
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验1. 硝酸纤维素膜 硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光（Luminol类）、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在无离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了；比如NC膜很容易封闭，也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间，不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆，又容易卷，操作要小心，不适合用于需要
1. *纤维素膜 *纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在无离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了；比如NC膜很容易封闭，也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长
，特别适合于蛋白印迹 。 就韧性而言：尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆，易破碎;PVDF膜较强。 就重复性而言：尼龙膜可反复用于分子 杂交，杂交后，探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜(NC膜)不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。 Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜? 硝酸纤维素膜：硝酸纤维素膜（NC膜）是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲 液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和
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