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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
瓶
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称 Jurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞哪里有买
规格: 瓶
形态特性:淋巴母细胞样
生长特性:悬浮生长
培养条件:RPMI1640(w/oHepes)+10%FBS
传代方法:维持细胞浓度在1×105~1×106cells/ml;2~3天换液1次。
冻存条件:基础培养基+8%DMSO+20%FBS
特征特性:该细胞是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat细胞株来源于一个14岁男孩的外周血;经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体中的一种诱导后可产生大量IL-2(IL-2的产生需两种类型的诱导剂);
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
Jurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
ELISA Kit for Human Angiomotin 31.2-2000 pg/mL
CD50 / ICAM-3 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL
ELISA Kit for Human Acetyl-CoA acetyltransferase, mitochondrial 0.156-10 ng/mL
CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 抗體, 兔單抗 FCM 50 µg
Cytokeratin 19 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB IP 50 µg
ELISA Kit for Human P2X purinoceptor 7 0.312-20 ng/mL
CD200 抗體, 兔單抗 IHC-P 50 µg
人CX3C趋化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA试剂盒 1.56-100 ng/mL
转基因植物TETR基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 15.6-1000 pg/mL
人透明质酸酶-1(Hyal-1/HAase)ELISA试剂盒 0.156-10 U/L
Jurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞哪里有买多奈哌齐III型(标准品) Donepezil HCl 1211-70-3 质量规格:HPLC>98%,标准品
Thrombin 凝血酶 10u 支
米屈肼(标准品) Mildronate,Meldonium 86426-17-7 质量规格:HPLC≥98%,标准品
洛索洛芬钠 Loxoprofen sodium 80382-23-6 质量规格:≥98.5%(按照干品计算)
17-Methyltestosterone 睾酮-睾丸酮 -18-4 1mg
氯米帕明N氧化物 Clomipramine N-Oxide 14171-67-6 质量规格:进口
整形素 Chlorflurenol-methyl 2536-31-4 质量规格:>90%,BR
O-Dianisidine dihydrochloride 邻联茴香 1g 瓶
L-状腺素/状腺素 Levothyroxine 51-48-9 质量规格:>98,BR
DL-Aspartic acid DL-天门冬氨酸 25g 瓶
2,4'-二二酮(>95.0%(GC)) 2,4'-Difluorobenzophenone 342-25-6 质量规格:>95.0%(GC)
pH计电极保存液 50ml 瓶
托芬那酸(标准品) N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid 13710-19-5 质量规格:UV法含量测定
牛脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒 2ml/KIT 盒
赖氨匹林(标准品) DL-Lysine Acetylsalicylate 62952-06-1 质量规格:UV法含量测定
环丙沙星 Ciprofloxacin HCl 93107-08-5 质量规格:进口
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文献和实验CAR-T 攻克实体瘤又出新招!超声「遥控」细胞靶向治疗癌症
导读T 细胞在人体抗击肿瘤过程中至关重要,而 CAR-T(嵌合抗原受体 T)细胞,即被基因工程改造的 T 细胞,具有针对癌细胞的定向特异性,是一种很有前景的治疗癌症的方法。对白血病和淋巴瘤细胞具有强大的杀伤作用,近年来发展迅猛、方兴未艾。然而,CAR-T 疗法的毒副作用也不容忽视。CAR-T 在识别和杀伤肿瘤细胞时,是通过肿瘤细胞表面的抗原进行识别的,比如 CD19CAR-T 在治疗急性 B 淋巴细胞白血病的过程中,CAR-T 细胞通过识别肿瘤细胞表面的 CD19 抗原而杀伤肿瘤。但是,正常
VP16耐药株JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染Jurkat D,E 人T淋巴瘤细胞转基因细胞(B类)Jurkat E6-1 人T细胞淋巴瘤Jurkat77 人T淋巴瘤细胞亚系 K562 人红白血病细胞 KB 人口腔上皮癌 LNCaP 人前列腺癌 LoVo 人结肠癌 M17 人神经母细胞瘤 M2 待查 MCF7 人乳腺癌细胞 MCF7B 人乳腺癌细胞
/Gilead),已经在淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤等常见的液体肿瘤治疗中取得临床成功。如图1所示,自体CAR-T材料的开发和扩增涉及多个阶段。在所有阶段,均需要对所产生的产品进行质量和功能评估,同时尽可能地缩短从最初捐赠到重新引入患者体内的时间。 图1. CAR-T流程图解 iQue® 高通量流式细胞仪作为一种高通量、多参数、低成本的细胞定量分析工具,为进一步提升CAR-T细胞的构建效率以及治疗反应等提供解决方案。 接下来,我们通过两个案例分享一下iQue® 3高通量流式细胞
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