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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
200ml
产品名称 马外周血淋巴细胞分离液试剂盒价格
规格: 200ml
储存条件 18-25℃保存,有效期2年
单位 盒
本品用于分离马外周血淋巴细胞。
保存:18℃-25℃保存,有效期两年。本品易感染细菌,需无菌条件下操作。无菌条件下操作,启封后常温保存。如4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
TM培养基 英文名称:Thayer Martin Agar 产品规格:250g
2 ug pHCMC05 pHCMC05 低温运输,-20℃保存
250mL Sodium Chloride Solution(氯化钠溶液),5M Sodium Chloride Solution,5M 常温保存
亚硫酸铁琼脂 250g
100次 植物种属鉴定PCR Mix 11(质体 trnL(P6)) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMBP- P pMBP- P 低温运输,-20℃保存
麦康凯琼脂培养基 供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌。(《中华人民共和国药典》2010年版) 250
液体连四硫酸盐培养基 英文名称:Fluid Tetrathionate Medium 产品规格:250g
1 管 TB1大肠杆菌 TB1 E.coli Strain -80℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH9.0 MOPS Buffer,1.0M,pH9.0 常温保存
甘露高盐琼脂 Mannitol Salt Agar 250g
25uL 辛标记dUTP溶液 (0.35mM) DIG-11-dUTP -20℃保存
2 ug pIEXBac-1 pIEXBac-1 低温运输,-20℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer(磷酸钠缓冲液),0.5M,pH8.0 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.0 常温保存
七叶苷培养基 英文名称:Esculin Medium 产品规格:10
100uL 苹果actin PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
50mL EGTA Solution(EGTA溶液),1M,pH8.0 EGTA Solution,1M,pH8.0 常温保存
马外周血淋巴细胞分离液试剂盒价格矮壮素(标准品) (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride 999-81-5 质量规格:分析标准品
17-去乙酰罗库铵 17-Desacetyl Rocuronium 119302-86-2 质量规格:美国进口
去木香内酯(标准品) Dehydrocostus Lactone 477-43-0 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Monensin sodium莫能霉素钠/莫能菌素钠 1g 瓶
Forchior fennron 吡脲 KT-30 1g 瓶
基泼尼松龙(标准品) Methylprednisolone -43-2 质量规格:HPLC>97.5%,标准品
Doxycycline hyclate 强力霉素 5g 瓶
维生素 E, 生育酚 Vitamin E,dl-α-tocopherol 10191-41-0 质量规格:>98%,油状
匹格列酮盐 Pioglitazone HCl 112529-15-4 质量规格:>98.5%
DMS DMS 14620-72-5 质量规格:BR
进口蓝盖试剂瓶 25ml 个
贝他定(进口) Bestatin HCl 65391-42-6 质量规格:≥98%,美国进口
切片盒 1片 盒
Oxyresveratrol 氧化白藜芦醇 29722-9 20mg
Ginsenoside Rh2 人参皂苷Rh2 784-33-2 20mg
NP-40 LYSIS BUFFER 裂解液 1ml 瓶
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文献和实验度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100
ELISPOT检测,最好采用新鲜血液。在保证无菌操作的前提下,首先应保证取血时抗凝剂应及时充分的与血液混匀,避免血凝块的出现。抗凝血最好及时提取PBMC,避免放置时间过长,室温下避免过夜。应选用分离效果好的淋巴细胞分离液,避免PBMC中混有过多其他细胞成分或杂质。 2. 在分离外周血淋巴细胞时,发生了溶血,会影响我的试验结果吗? 答:外周血出现溶血后,在使用淋巴细胞分离液分离PBMC时,溶血产生的细胞碎片、血红素等杂质将极大可能悬浮
正常人外周血中的干/祖细胞的含量占有核细胞数的1%左右,经有效动员后,骨髓中的造血干细胞会释放到外周血中,使外周血中的干/祖细胞比例明显增高。动员外周血是指用有效的动员剂对供者进行动员后采集的外周血。重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)是外周血动员最常用的动员剂,它可选择性的作用于粒系造血祖细胞,促进其增殖、分化,并可增加外周血中性粒细胞的数目和功能。动员外周血单个核细胞是采集经动员后的健康供者的外周血,采用密度梯度离心的方法提取其单个核细胞,其各亚型细胞的数量、细胞免疫表型、分泌
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