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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
47
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
48T
是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测 的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的
成分，但不能检测其他非成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
| 产品名称 | 新型科研N基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） |
| 规格 | 48T |
| 编号 | HE32277-R |
荧光化学物质：
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
荧光定量PCR服务：
简介：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
2,5-二苯恶唑phospholipase D
2,5-二苯恶唑Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 1
1，4-双（5-苯基-2-恶唑）苯long chain fatty acids
1，4-双（5-苯基-2-恶唑）苯Hantaan virus antibody
1，4-双（5-苯基-2-恶唑）苯Lymphocytic Choriomeningitis Virus Antiody
1，4-双（5-苯基-2-恶唑）苯Coxsackievirus A16
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新型科研N基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）96%5g25gTris-酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)coagulation factor XIIIBR，97%96%5gBMPR-Ⅱ
96%100g500gTris-酸电泳粉剂(50×TAE)Tripeptidyl-peptidase 1BR，98%96%100gBGP;OCN
96%25g25gTris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)hydatid disease antibodyBR，98%96%25gBALP
≥85% (HPLC),用于荧光分析5g5gTris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)Heat Shock Protein 90β1BR，98%≥85% (HPLC),用于荧光分析5gOPN
96%1g100gTris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE,RNase free)lipocalin-2BR，97%96%1gBAP
96%5g25gTris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)Hepatitis A virus antibodyBR，97%96%5gALP-B
>97.0%(GC)1g500gTris-硼酸电泳粉剂(5×TBE)plasmodium falciparum antibodyBR，96%>97.0%(GC)1gBSP
>97.0%(GC)25g10mgTris-酸电泳缓冲液(10×TPE)plasmodium falciparum antibodyBR，96%>97.0%(GC)25gCrossLaps
97%5g25gTris-酸电泳缓冲液(10×TPE,RNase free)Anti-coagulation factor IIIBR，96%97%5gSREBPs
97%1g5gTAFE凝胶电泳缓冲液(10×)Chemokine C-C-Motif Ligand 2BR，99%97%1gSREBP-1
原理:
新型科研N基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
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文献和实验测量和鉴别非常微量的特异性核酸，从而可通过监测 CT 值而实现对原始目标基因的含量定量。实时荧光定量 PCR 法最大的优点是克服了终点 PCR 法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差，实现 DNA/RNA 的精确定量。 该技术不仅实现了对 DNA/RNA 模板的定量，而且具有灵敏度和特异性高、能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点，该技术在医学临床检验及临床医学研究方面有着重要的意义。 microRNA 实时荧光定量 PCR 的技术特点 虽然 microRNA 实时
状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合，其荧光增加1000倍。所以，一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列，且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点：实验设计简单，仅需要2个引物，不需要设计探针，无需设计多个探针即可以快速检验多个基因，且能够进行熔点曲线分析，检验扩增反应的特异性，低的初始成本，通用性好，因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法（Taqman 技术）：PCR
工作效率，为实验制定严格时间进度而不会受其它因素影响，科研人员将会有更多的时间和精力从事创新性的工作。海基生物可为客户提供以下分子生物学服务：大规模的核酸提取及纯化，PCR克隆及亚克隆，RT-PCR, Real-time PCR, 基因突变， 载体 构建，基因敲除, 质粒制备，SNP检测及数据分析等。凭借其丰富的生物技术服务经验，海基生物的分子生物学团队完全可以为客户解决任何技术难题。 2.上海锐赛生物技术有限公司 上海锐赛是由一群海内外从事科学技术研究和生物
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