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信帆生物
产品简介:
维生素 C(Vitamin C)又称 L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素,在生物体内维生素 C 是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc 有L-型和 D-型两种异构体,只有 L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。
维生素 C 检测试剂盒(磷钼酸微板法)检测原理是在强酸和偏磷酸根离子存在条件下,钼酸铵能与还原型维生素 C 反应生成蓝色化合物,在一定浓度范围吸光度值与浓度呈线性关系,以酶标仪 760nm 处检测吸光度,获得 Vitamin C 含量。该试剂盒主要用于植物组织中的还原型维生素 C(抗坏血酸)的检测,其优点是:1、反应迅速;2、操作简便;3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰,专一性好。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料:
1、蒸馏水
2、电子天平、研磨器或匀浆器
3、离心机、离心管或试管、水浴锅或恒温箱、酶标仪、96 孔板
操作步骤(仅供参考):
1、配制组织匀浆液:按组织匀浆液 A:组织匀浆液 B:蒸馏水=8:1:91 的比例混匀即得。
2、准备样品:取待测材料如青菜、水果、松针等,清洗擦干,准确称量 1g,加入研磨器
内,再加入少量组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用组织匀浆液研磨,最后一并倒入 10ml 离心管,补充组织匀浆液至 10ml,充分混匀,4000r/min 离心 5min,取 0.05ml 上清液,加入等量蒸馏水,即为待测液。
3、配制 MPA 工作液:称取 0.3g MPA 粉末,充分溶解于 10ml 酸性缓冲液Ⅰ中,也可根据使用情况称取一定量的 MPA 按比例溶解即可,4℃保存 3~4 天有效。
4、配制 Vitamin C Assay buffer:取钼酸铵粉末 0.5g,充分溶解于 10ml 蒸馏水中,也
可根据使用情况称取一定量的钼酸铵加水按比例溶解即可,4℃避光保存。注意:钼酸铵溶于水会逐渐变化成乳白色浊液,则不能使用。
5、配制系列 Vitamin C 标准:将 25mg Vitamin C 标准用 1ml 组织匀浆液溶解即得
Vitamin C 标准(25mg/ml),再用蒸馏水稀释成 Vitamin C 标准(250ug/ml),取干净离心管或试管,按下表进行操作,依次稀释。Vitamin C 标准(25mg/ml)放置-20℃,短期保存。
6、Vitamin C 加样:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 Vitamin C 含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置 2 平行孔,求平均值。
7、Vitamin C 测定:立即混匀,30℃水浴 20min,空白调零,以酶标仪测定 760nm 处系列标准孔、测定孔的吸光度。
计算:以系列标准 Vitamin C (50、75、100、125、150、200、250μg/ml)为横坐标,
以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程,以测定孔的吸光度代入回归方程
求得样品维生素 C 含量。
100g 样品中维生素 C 含量(mg)
=(c0×V1)×100/(m1×1000)=(c0×V1) /(m1×10)
式中:c0 :待测样品的吸光度值在标准曲线上查出的维生素 C 的浓度(μg/ml)
V1 : 待测液的总体积(ml)
m1 : 样品质量(g)
1000 : μg 换算成 mg
注意事项:
1、 Vitamin C 标准避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、 组织匀浆液 A 保存温度过低时易产生结晶,可用温水浴溶解后再使用。
3、 Vitamin C Assay buffer 室温保存时间过长或者过期会出现白色粘稠物,不可使用,应换新的产品使用。不使用时建议 4℃保存。
4、 待测样品如不能及时测定,应置于 2~8℃保存,3 天内稳定。
5、 如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
有效期: 6 个月有效。常温运输和保存。
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文献和实验●维生素e是细胞膜内重要的抗氧化物和膜稳定剂。补充维生素e(400至1600国际单位/天)可减少由大强度运动或其他情况引起的自由基增加对肌体的损伤。推荐每天补充维生素e的剂量为:400至800国际单位。 ●补充维生素c可明显降低运动诱导的氧化应激。补充维生素c的安全剂量是0.5至3.0克/天。推荐每天补充维生素c的剂量为0.5至2.0克。 ●适当补硒可提高谷胱甘肽过氧化物酶活力,从而提高肌体的抗氧化的能力。建议的补硒剂量为每天100至250微克
生物为了维持正常的生理功能,需要微量,但本身不能生物合成,作为营养素必须从其它天然化合物摄取,这样一类的有机物就是维生素。对动物来说,就是指普通蛋白质,糖、脂肪以外的物质。维生素的历史始于 E. W. Carter( 1535),关于吸吮柑桔叶来治疗坏血病的记录,早在 17世纪,为了预防坏血病,在远洋船中已贮备有柑桔和柠檬。在早期的研究中,高木兼宽( 1882)通过改善膳食,成功地预防了脚气病, C. Eijkman( 1890— 97)用米糠的水或醇的提取物成功地治疗了脚气
佚名 维生素C又名抗坏血酸(ascorbic acid),它是含有内脂结构的多元醇类,其特点是具有可解离出H+的烯醇式羟基,因而其水溶液有较强的酸性。维生素C可脱氢而被氧化,有很强的还原性,氧化型维生素C(脱氢抗坏血酸dehydroascorbic acid)还可接受氢而被还原。 维生素C含有不对称碳原子,具有光学异构体,自然界存在的、有生
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