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Human/Mouse HIF
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碧云天的 Human/Mouse HIF-1α ELISA Kit (Human/Mouse Hypoxia-Inducible Factor 1αEnzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人、小鼠缺氧诱导因子1α酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人及小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的HIF-1α的ELISA试剂盒。本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为43pg/ml,与HIF-1α等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。缺氧诱导因子1 (Hypoxia-Inducible Factor 1,HIF-1)最初被认为是一种在低氧条件下具有转录激活作用的核因子,在结构上具有螺旋-环-螺旋结构,是由HIF-1α和HIF-1β所组成的异质二聚体。HIF-1α在体内表达广泛,体内浓度受到氧含量影响,在含氧量正常的情况下,HIF-1α能够在泛素蛋白酶介导下被快速降解,但在缺氧条件下,HIF-1α则能稳定存在。相反,无论氧含量高低,HIF-1β体内浓度均不会发生太大变化。HIF-1在血管生成、红细胞生成和血管舒缩控制等多种氧含量相关的发育或维持自身稳态过程中都具有一定影响。HIF-1α还能促进调节细胞存活的基因发生转录,在发生组织损伤后,促进血管再生。HIF-1α的过表达与多种肿瘤患者的死亡率增加有关。这可能是由于HIF-1α能够促进肿瘤部位新生血管生成、增强肿瘤侵袭、转移特性、提高肿瘤细胞抗凋亡的能力。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中HIF-1α的浓度,其原理见图1。HIF-1α特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的HIF-1α会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗HIF-1α抗体后,生物素化抗HIF-1α抗体与HIF-1α结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。HIF-1α浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中HIF-1α浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。包装清单:
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