鬼笔环肽Biolite 647标记

鬼笔环肽-Biolite 647标记

货号	23127	存储条件	F/L
规格	300 Tests
Ex (nm)	650	Em (nm)	665
分子量	1632.87	溶剂	DMSO
产品详细介绍

简要概述

   

鬼笔环肽是从一种菌类Amanita Dhalloides所提取出来的环肽。它与F-actin竞争性的结合。荧光标记的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶于水，为检测组织切片，培养细胞和无细胞体系中的actin的定位和定量提供了非常方便的标记方法。

Biolite 647标记的鬼笔环肽，可发出高亮度、稳定的远红外荧光，染色反应特异性强，对比性高，适合用作F-actin的定性和定量检测。与Actin抗体比较，Biolite 647标记鬼笔环肽具有以下特点：
1 与actin亚单位一比一结合，且不与G-actin结合，比Actin抗体的染色效果更好；
2本品的结合没有物种差异性，适用性广泛；
3鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略，因而图像的反差较好；
4染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容，包括荧光蛋白和其他Alexa Fluor偶联物（包含Alexa Fluor偶联二抗）；
5与其结合后的F-actin仍能维持actin自身的许多生物学特性。

产品光谱图：

产品说明书

样品分析方案

概述

在微孔板孔中制备样品

从样品中取出液体

添加鬼笔环肽-iFluor 647标记溶液（100μL/孔）

在室温下染色细胞20至90分钟

清洗细胞在显微镜下观察样品

注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。

 

操作步骤

1.制备1000 X鬼笔环肽DMSO储备液：将30μLDMSO加入小瓶中。

2.制备1X鬼笔环肽结合物工作溶液：加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1mL含1％BSA的PBS中。

注意1：鬼笔环肽结合物未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃，避光。

注意2：不同的细胞类型可能染色不同。鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度的制备需要根据实际而定。

3.染色细胞：

3.1执行甲醛固定，在室温下将含3.0-4.0％甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。

注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

3.2用PBS冲洗固定细胞2-3次。

3.3可选：在PBS中加入0.1％Triton X-100固定细胞（步骤2.2）3至5分钟，以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

3.4将100μL/孔（96孔板）鬼笔环肽缀合物工作溶液（来自步骤1）加入固定的细胞（来自步骤2.2或2.3）中，并在室温下染色细胞20至90分钟。

3.5在加上盖玻片之前，用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽结合物，然后在显微镜下进行，密封和成像。