Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针),也称MitoTracker Red CMXRos,是一种具有细胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine,简称CMXRos),能够特异性地标记细胞中具有生物活性的线粒体,检测线粒体膜电位。本产品为高纯度探针,兼容后续的细胞固定和通透,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定程度的下降。
本产品是一种氧化型的红色荧光染料,只需简单地和细胞孵育,即可通过被动运输穿过细胞膜,并借助本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基(mildly thiol-reactive chloromethyl)官能团特异性地标记有生物活性的线粒体。本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基,可以和线粒体内蛋白的巯基反应并共价连接,因此后续实验使用多聚·甲醛或甲醛等醛类固定剂,以及细胞通透的去垢剂Triton X-100等处理时,线粒体的荧光标记不会消失,但可能会有一定程度的下降(约下降2-10倍)。由于本荧光探针的激发光谱和发射光谱与常见的绿色荧光探针重叠较少,因此非常适合用于荧光双标实验。
Mito-Tracker Red CMXRos分子式为C32H32Cl2N2O,分子量为531.5,CAS number为167095-09-2,Mito-Tracker Red CMXRos呈红色荧光,最大激发波长为579nm,最大发射波长为599nm。Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱以及结构式参考图1。
图1.Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱(A)以及结构式(B)。
Mito-Tracker Red CMXRos可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似,Mito-Tracker Red CMXRos对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位,因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色,不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。使用Mito-Tracker Red CMXRos染色活细胞线粒体效果参考图2。
图2. Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针)染色NRK-52E细胞(大鼠肾小管上皮细胞)线粒体的效果图。图A为明场下大鼠肾小管上皮细胞形态图;红色荧光为Mito-Tracker Red CMXRos染色的大鼠肾小管上皮细胞线粒体(图B),绿色荧光为在Mito-Tracker Red CMXRos染色后经固定、通透再使用Tubulin-Tracker Green (抗体法微管绿色荧光探针) (C1051)对微管进行的染色(图C),图D为Mito-Tracker Red CMXRos、Tubulin-Tracker Green及DAPI三重染色的大鼠肾小管上皮细胞的线粒体、微管与细胞核荧光的叠加图。实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
由于Mito-Tracker Red CMXRos在线粒体内的聚集依赖于线粒体的膜电位,因此本产品也可以作为线粒体膜电位的指示探针,通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
本产品为DMSO溶液,浓度为1µg/µl,约1.88mM。按最终工作浓度为50-200nM计算,本产品每50µg可以配制约500-2000ml Mito-Tracker Red CMXRos工作液。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
C1049B-50µg |
Mito-Tracker Red CMXRos (1µg/µl) |
50µl |
C1049B-250µg |
Mito-Tracker Red CMXRos (1µg/µl) |
250µl |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃避光保存,一年有效。
注意事项:
Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针)可以用于活细胞的线粒体荧光染色,不适合用于固定后细胞或者组织的染色;但在用本产品标记线粒体后,后续可以进行固定和通透,并用其它探针进行染色或进行免疫荧光染色,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定的下降。而且不同的细胞,固定和通透的影响会有所区别,建议对固定和通透试剂、条件进行一定的测试。
本产品仅包含非常微量的粉末,使用前请先离心数秒钟,使微量粉末充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
使用本产品可以在常见的多孔板或培养皿中进行荧光染色,也可以在盖玻片或载玻片上进行荧光染色。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。