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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
491
- 英文名:
ROX reference dye(For qPCR)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷冻(-20℃)
- 规格:
1mL
特别提示:包括ROX参考染料(qPCR专用)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:ROX参考染料(qPCR专用)
英文名称:ROX reference dye(For qPCR)
产品货号:GS0170
产品规格:1mL
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
ROX参比染料(ROX Reference Dye)设计用于对实时定量PCR或RT-PCR中的荧光报告基因信号进行标准化。
应用
对与PCR无关的荧光波动进行标准化,为多重定量PCR和RT-PCR提供稳定的基线,使用现有的ROX光谱设置,无需重复校正热循环仪。
我公司销售的ROX参考染料(qPCR专用)北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验。G. 反应体系的设置:A-G这五个步骤简单设置好,可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”。设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器,点击RUN!Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
管内是否有气泡残留。 (4)扩增曲线呈锯齿状且不连续 这个可以参考上图,这是典型的 ROX 添加不当导致的异常结果,曲线杂乱。大家首先可以尝试去掉 ROX 分析数据,看一下重复性是否 OK(复孔间 STD (5)使用 AceQ 产品无扩增或 CT 值很大 这类问题小 V 也经常接到客户咨询,主要原因是 Vazyme #AceQ 是化学修饰的热启动酶,预变性时间至少 5 min,如果是高 GC 的模板,可以延长预变性时间至 10 min,预变性时间不够,会导致酶活未完全释放,酶活释放不好
时发现,这个实验其实是有扩增的,但原本应该平直的 ROX 荧光曲线却呈现出一个跟 SYBR 颠倒对称的图形(图 12B)。我们查看 Raw data 时发现其第一通道荧光(FAM)是正常上升的,第四通道荧光(ROX)也是维持在正常水平,这就怀疑可能与校准文件异常有关。这台仪器在重新做了 SYBR 荧光校准以后,扩增曲线就恢复正常了,也能得到正常的 CT 值。 图 12 校准文件异常导致曲线异常 关于扩增曲线异常的更多案例分析可以参考我们之前的推文《荧光定量 PCR 异常扩增曲线分析攻略
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