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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
217
- 英文名:
One Step Western Blocking Buffer
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
100ml
特别提示:包括一步法Western专用封闭液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法Western专用封闭液
英文名称:One Step Western Blocking Buffer
产品货号:WE0296
产品规格:100ml
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。本产品以奶粉为基础,采用独特配方,专用于百奥莱博一步法WB检测中的封闭步骤,可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
注意事项:
1、每次使用时,必须保证封闭液将印迹膜完全浸没,以免影响封闭效果。
2、本产品含有防腐剂,操作时请佩戴手套进行防护。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、本产品无需稀释,开盖即用。
2、目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量One Step Western Blocking Buffer。
3、室温孵育5分钟。
4、封闭结束后弃去封闭液,进行一步法Western Blot后续操作。
储存条件:2~8℃
我公司销售的一步法Western专用封闭液优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验技术,二抗是生物素化的多克隆抗体,三抗是亲和素生物素体系,不知采用这样的方案后,封闭液是否要作调整,能否再用5%的脱脂奶粉呢?好像有资料说脱脂奶粉会影响亲和素生物素的生成,是吗?解答:不能使用脱脂奶粉,因为脱脂奶粉中含生物素,用BSA代替应该好一点.M. 还有一问题,一般一次上样的蛋白总量是多少,跟目的蛋白的表达量有关系吗?解 答:Western Blot一般上样30-100微克不等,结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和抚育时间都有关系,也与显色时间长短有关。开始摸条件时,为了拿到阳 性
。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色,以观察蛋白的残留情况。 4. 封闭(Blocking): 转膜完毕后,立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中,漂洗1-2分钟,以洗去膜上的转膜液。吸尽洗涤液,加入Western封闭液,在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。 从转膜完毕后所有的步骤,一定要注意膜的保湿,避免膜的干燥,否则极易产生较高的背景。 对于一些背景较高的抗体,可以4℃封闭过夜。 5. 一抗
。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色,以观察蛋白的残留情况。 4. 封闭(Blocking): 转膜完毕后,立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中,漂洗1-2分钟,以洗去膜上的转膜液。吸尽洗涤液,加入Western封闭液,在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。 从转膜完毕后所有的步骤,一定要注意膜的保湿,避免膜的干燥,否则极易产生较高的背景。 对于一些背景较高的抗体,可以4℃封闭过夜。 5. 一抗
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