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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 英文名:
Bulbus fritillariae thunbergii
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
负20度
Bulbus fritillariae thunbergii
规格:50次
产品及特点
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.卓越的特异性;2.多重反应(高通量);3.反应体系配置,无需冰块;4.无惧高GC含量PCR;5.预防交叉污染;6.广泛的设备兼容性。
| 产品名称 | 方法 | 规格 | 价格 |
| 蕲蛇LAMP鉴定试剂盒 | LAMP | 50次 | 2490元 |
| 蕲蛇PCR鉴定试剂盒 | PCR | 50次 | 1490元 |
| 蕲蛇染料法PCR鉴定试剂盒 | 染料法 | 50次 | 2490元 |
| 蕲蛇探针法PCR鉴定试剂盒 | 探针法 | 50次 | 3490元 |
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蕲蛇,与其他微生物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 蕲蛇PCR引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 蕲蛇PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 核酸释放剂(试用装) | 试剂五 | 20 次(1 mL,绿盖) |
| 使用手册 | 试剂六 | 1 份 |
自备试剂:样品 DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 蕲蛇PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18 μL | -- |
| PCR 阳性对照(蕲蛇PCR阳性对照的 1000 倍稀释液) |
-- | -- | 18 μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应(35 个循环) | 95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染
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文献和实验的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
。 PCR扩增每个基因座的多态性区域是分析精子的第一步。两个基因座用两组引 物,同时引物必须位于多态性区域的边侧。当精子两个靶序列经PCR扩增,就确定了 每个基因座的等位基因成份。人工合成的寡核苷酸探针可识别等位基因小到仅发生单 个碱基置换的实验方法已得到改进,这些等位基因牧场划的寡聚物(ASO)探针第一 次应用是将人正常β珠蛋白基因中的正常βA等位基因与镰刀形红细胞(βA)的突变 区分开来。本方法检测等位基因需要人工合成的小片段寡核苷酸(典型的长19bp)。 每个寡核苷酸与一个等位
min左右后进行电泳。(3)溴化乙锭(EB)(10mg/ml):在20ml水中加入0.2g溴化乙锭,磁力搅拌数小时。然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,室温保存。(4)加样缓冲液(Loading Buffer)一般为6×Loading Buffer二、电泳鉴定时注意事项:佩戴一次性手套,避免皮肤接触EB。无路做胶还是电泳缓冲液尽量用新的,不要超过两周。三、电泳步骤1、50×TAE取10ml稀释成500ml,取50ml溶解0.5g琼脂糖。电炉上煮沸后加入EB 5ul。另外450ml TAE倒入
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