英文名:QuantiTect SYBR Green PCR Kit (200) 中文名:QuantiTect SYBR Green 荧光定量PCR试剂盒 (200) 品 牌:Qiagen 货 号:204143
使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR,用于基因表达分析
整合热启动,PCR特异性高
可靠定量检测低丰度转录本
准确定量检测各种起始量样本
提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)两种包装
无需优化反应和循环条件
QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和独特的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。
特点
参数
应用
Real-time quantification of genomic DNA or cDNA targets
QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有优化的即用型预混液,可使用SYBR Green I对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析,无需合成靶标特异性标记引物。独特的PCR缓冲液含有K+和NH4+,能促使特异性引物退火,获得高PCR特异性和灵敏度(参见Specific primer annealing)。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。
QuantiTect SYBR Green PCR预混液含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)预处理,保证之前反应残留的PCR产物会影响后续的PCR反应。
2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的组份
组份
特点
优势
HotStarTaq DNA Polymerase
95ºC孵育15分钟即可活化
室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green PCR Buffer
NH4+和K+的平衡组合
特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix
含有dUTP,会部分替代dTTP,可进行UNG处理
可选择进行UNG处理,以消除之前反应残留的PCR产物
SYBR Green I dye
DNA双链结合时,生成强烈的荧光信号
高度灵敏的定量检测
ROX dye
在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准
可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪
操作流程
QuantiTect SYBR Green PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中,即可开始反应(参见Two-step RT-PCR)。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。
QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe网站上方便地订购。