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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
MBMEC
- ATCC Number:
小鼠脑微血管内皮细胞
- 细胞类型:
贴壁
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
22
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
资源名称 小鼠脑微血管内皮细胞说明书
种属:MBMEC
类型:贴壁
分离基物:脑微血管;内皮细胞
安全等级:1
模式:菌株未知
培养方法
培养基:H-DMEM,90%;FBS,10%;双抗
生长条件:Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
存储条件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%(for reference) Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞培养步骤:
一.小鼠脑微血管内皮细胞说明书培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
麦芽糖醇shēng huà shì jì容量:25克
256644环丙基,工业%2CYCLOPROPYLETHANOL
D甘露糖胺盐酸盐100克
2,5二轻呋 97% 2,5Dixy7nofurcn 0898
4,6二脒基2本基吲哚1公斤
DL2基3巯基盐酸盐,英文名或英文缩写:DLCysteine HC1,级别:BR,99%,规格:25克
1无水酸钾potewwium silicate
LGLUTAMINEL谷酰胺高级白色精细粉末RTsigma
氢钠一水 Sodium bisulfate monohydrate,≥99.0% 1003 100G 通用试剂
刺五加皂苷B Ciwujianoside B (≥98%,HPLC) 1108 20MG 标准品
牛血清白蛋白(第五组份)25克RT
BetaineHCl 100g/250g/1kg原装 Amresco K6
铋芬,英文名或英文缩写:Bismuth,级别:TLC,规格:25克
高铼醋铵;过铼醋铵 cMMoniuM pqrrhqnctq 298627
(S)2本,英文名或英文缩写:Lpxenylalaninol,级别:BR,98%,规格:5克
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
正常大鼠肾细胞;NRK
SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
22RV1细胞,前列腺癌细胞 人肝癌细胞,Bel-7405细胞 CL-0024Anglne(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2
小肠血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
IL1RAPL1 Others Human 人 IL1R8 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠脑微血管内皮细胞说明书人脐带间充质干细胞RNAHUMSC miRNA5 μg
CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人细胞裂解液 (阳性对照)
恒河猴肾细胞;LLC-MK2
RKO-E6细胞,人结肠癌转基因细胞 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞,M619细胞 人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16
HEC-1-B(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
ALPL Others Human 人 ALPL / TNAP 人细胞裂解液 (阳性对照)
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文献和实验脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征,从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障[1]。由于体外培养的脑微血管内皮细胞保持了较多的其体内固有的特点[1],因此目前脑微血管内皮细胞
摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集内皮细胞, 进行传代培养。原代、传代各取8 例, 吸取培养液用酶联免疫吸附试验测试TPA 活性。 结果 经Ð 因子相关抗原免疫组织化学鉴定、细胞超微结构观察, 证明培养的是血管内皮细胞。培养
实验材料: 1. 正常兔大脑皮质组织; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. M199培养液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素);D-Hanks液;0.05%胰蛋白酶溶液;0.05%胶原酶溶液;15%右旋糖苷(用Hanks配制,pH7.4); 4. 匀浆器、手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科
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