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CYTO-ID® 自噬检测试剂盒 2.0

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  • ¥6930
  • Enzo
  • ENZ-KIT175-0200
  • 2025年10月03日
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    CYTO-ID® 自噬检测试剂盒 2.0

     

      CYTO-ID® Autophagy Detection Kit 2.0 使用新型染料检测自噬小泡和监控活细胞自噬流,选择性标记积累的自噬小泡。染料已通过优化,不染溶酶体,在自噬前体、自噬体和自噬溶酶体里呈现出明 亮的荧光。该试剂盒提供了一种无需细胞转染,可以在活细胞中监控细胞自噬的快速定量方法。

     

    ◆特点

      ● 更明亮,更耐光,特异性染色自噬小泡

      ● 无需转染及转染效率验证

      ● 快速量化原生异质性细胞群中的自噬

      ● 不染溶酶体,减少其他染料的背景干扰

       便于高通量筛选自噬激活剂和抑制剂
     

    ◆原理

      该产品所用探针是阳离子两亲性示踪剂(CAT)染料,以类似诱导磷脂药物的方式迅速进入到细胞中。染料的功能基团能够选择性标记与自噬通路相关的小泡,而不会在溶酶体中聚集。

     

      胞内物质被扩大的膜囊包裹,吞噬泡形成双层膜囊泡,成为自噬体。自噬体外膜随后与溶酶体融合,和内部物质被自噬性溶酶体降解。自噬的各种调节因子也被描绘于图中。

    8-汉化.jpg

    自噬原理图

     

    ◆应用

    CYTO-ID® 绿色检测试剂2(A组)在PBS确定的吸光度和荧光图谱(499/548 nm)。

      Hoechst33342(图B)在1X测定缓冲液来确定的吸光度和荧光图谱(350 /461 nm)。

    0914707264541130.jpg

    HeLa cells使用 CYTO-ID® Green Detection Reagent 2进行染色

      (A) 完全培养基 (B) 在饥饿培养基 (EBSS)中添加40 µM Chloroquine培养4 h 。在含有Chloroquine 的EBSS培养基中培养的细胞表现非常明亮的绿色荧光信号和点状结构。

    0914707266841378.gif

     

    运用流式细胞术分析Jurkat细胞的自噬

      通过0.5 µM Rapamycin (RAP), 10 µM Chloroquine (CLQ)处理或不处理Jurkat细胞,或两者一起处理20 h。CYTO-ID® Green Detection Reagent 2染色30 min后,洗脱,用流式细胞仪分析。直方图叠加呈现结果。用RAP+CLQ处理细胞显示荧光有升高。

    0914707270231375.jpg

     

    微孔板分析HepG2细胞的自噬

      HepG2经过DMSO(对照),0.5 μM Rapamycin (Rap), 10 µM Chloroquine (CLQ),或0.5 µM Rap 和10 µM CLQ同时培养20 h。细胞经过Hoechst 33342染色进行细胞数目标准化。Rap 和CLQ同时处理细胞显示自噬作用上升。

    0914707271881241.jpg

    ◆产品列表

    产品编号 产品名称 包装
    ENZ-KIT175-0200 Cyto-ID® Autophagy detection kit 2.0
    CYTO-ID®自噬检测试剂盒2.0
    200 tests

     

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    规格

    备注

    应用

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    FC,荧光显微镜,荧光检测

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