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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
MG-63
- ATCC Number:
人成骨肉瘤细胞
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
BJ-X3469 30
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
CM1-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,长梭形
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
公司供应的细胞仅用于科研实验。
资源名称 人成骨肉瘤细胞说明书
种属:MG-63
类型:贴壁生长
形态:CM1-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,长梭形
分离基物:该细胞源自14岁患有骨肉瘤的白人男性;
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
应用领域:聚次黄嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸可以诱导产生高水平的干扰素。该细胞表达TGF-β受体Ⅰ和Ⅱ。
培养方法
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含酸钠。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
细胞培养步骤:
一.人成骨肉瘤细胞说明书培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
HRP标记羊抗人C32000只/箱RT
3080分子筛3A型MOLECULAR SIEVES
半固体琼脂shēng huà shì jì容量:500毫升
2酚苄基迷 2(Phqnylmqthoxy)ncphclqnq 6
录化亚锡shēng huà shì jì容量:100克
DNA酶甲基绿琼脂基础500毫升
886铯(易)Cesium nitnate
镉1克RT
苊醌 Acequinone,98% 82860 5G 通用试剂
十二烷基 Lithium dodecyl sulfate (≥98.5%,GC) 206 5G 通用试剂
示蛋白胨(鱼粉)shēng huà shì jì容量:10克
9066法华林钠 wo7ium
nepxtxelene, 1fluoro4(trifluorometxyl) 590806
4羟基吲哚 4Hydroxyindole, ≥99.0% 201 1G 多肽试剂
5克RT
人胚肺成纤维细胞;MRC-5
猫肾细胞;CRFK
EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人细胞裂解液 (阳性对照)
人APP基因转染CHO细胞株;7WD10 食管癌细胞,Eca-109细胞 IBRS-2细胞,猪肾细胞系
人脑血管外膜成纤维细胞HBVSMC
HA Others H15N8 甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
人成骨肉瘤细胞说明书小鼠胚胎成纤维细胞;MEF
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人细胞裂解液 (阳性对照)
人小肠平滑肌细胞完全培养基 100mL
HFTF细胞,人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 小耳猪肺细胞;SEP-L2
CCL21 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白
P19(小鼠畸胎瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解液 (阳性对照)
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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文献和实验正在定购MG63 ,即人成骨头瘤细胞,但是以前没买过,都是从别人那直接扩培的,所以对于刚拿到细胞株要做的不清楚,恳请有经验的战友提供帮助。 打算买三瓶,新购进时应该会配培养基,那我是否需要提前配培养基(按厂家提供的培养基配方,是一拿到手直接冻到液氮里吗?还是先培养几天再冻?查文献发现很多种培养基都可以用,可否用实验室已有培养基培养,大约需要多久后才能用实验室的培养基培养。对于新买的细胞,必然是有说明书的,建议先定购说明书中的培养基,扩增后可以试试其它的培养基,当然是因为经费的问题。一拿到
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