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血清产品:主营胎牛血清,新生牛血清,成牛血清,马血清、驴血清、猪血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大鼠血清、小鼠血清、豚鼠血清,及牛血清白蛋白等
化学试剂:氨基酸,蛋白质,抗生素,碳水化合物,酶,维生素,色素,缓冲剂,葡聚糖凝胶系列,透析袋等。
标准品:植物提取产品数量多达2000多种,品类齐全。纯度高,质量,可提供图谱资料。黄曲m素标品。
感受态细胞:克隆感受态细胞、表达感受态细胞、根瘤农杆菌感受态细胞、发根农杆菌感受态细胞、酵母感受态细胞、大肠杆菌质粒等。
elisa试剂盒:种属涵盖大鼠小鼠,人,兔,牛,鸡,犬等。提供免费代测。
所有产品仅供科研,不用于临床。
实验室溶液配制方法
1.储备溶液配制:除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
ER Green 原液(500X):将20μLDMSO(组分C)加入到ER red (组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X ER red 储备溶液。 注意:20μL的500X ER red 原液足以容纳一个96孔板。 如果管子密封,未使用的500X ER red 储备溶液可以在≤-20ºC下储存两周。 避光。
2.工作溶液配制:将20μL500XER red 储备溶液加入10 mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,充分混合,制成ER red 工作溶液。 该ER red 工作溶液在室温下稳定至少2小时。 避光。
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文献和实验(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
文献对我很有启发,其中有些技术原理方面的内容如下:在含SDS缓冲液的样品中,小分子多肽的浓缩是较困难的,因为小分子多肽与SDS形成的复合体具有与SDS本身类似的电荷和大小,所以偏离了相对迁移率和分子质量对数的相互关系,因此浓缩对于小分子多肽的SDS-PAGE来说就成了一个突出问题。于是回去翻了翻自己曾经偶然跑出来的条带的模样,给我的感觉就是压缩的不好,然后还有弥散的现象(就是那种蛋白晕开的模样,例如这条带下面的波浪边缘,当然也可能是胶不均匀的原因吧,反正我当时就觉得是弥散的现象)然后我就突然有种
的 SDS-PAGE 的相关知识。(PS:附带一张简单明了的 DNA 印迹、RNA 印迹及蛋白质印迹流程图~~)一、配胶、制胶首先 SDS(十二烷基硫酸钠,一种阴离子洗涤剂)能使蛋白变性,并使所有蛋白质颗粒表面覆盖一层 SDS→使蛋白均匀地带上负电荷→从而使质量相似但形状或电荷不同的蛋白在电泳液中能以相似的速度进行迁移→→因此 SDS 被加到凝胶溶液、蛋白样品和电泳液中,以确保蛋白在整个过程都展开并保持负电荷。其实所谓的凝胶,其本质是聚丙烯酰胺。过程中,多格聚丙烯酰胺分子相互交联,最后形成一个蛋白
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