英文名:miRNeasy Mini Kit (50) 中文名:miRNA和总RNA纯化试剂盒 (50) 品 牌:QIAGEN 货 号:217004
从多种动物组织和细胞中纯化microRNA和总RNA
有效纯化miRNA和总RNA
高效富集miRNA和< 200个核苷酸的RNA
高纯度RNA适合多种下游应用
灵活的操作方法可用于共纯化或单独纯化各组分
miRNeasy Mini Kit可从多种类型的动物组织和细胞,包括难裂解的组织中纯化18个核苷酸(nt)以上的总RNA,也可单独纯化富集后的miRNA组分和总RNA(>200 nt)组分(单独纯化需要RNeasy MinElute Cleanup Kit)。miRNeasy Mini Kit利用离心柱进行低通量RNA纯化。miRNeasy Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化议上自动完成miRNA与总RNA的共纯化。
特点
参数
应用
PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脱体积
30 µl
规格
Spin column
主要样本类型
Tissue, cells
处理
Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
miRNA, total RNA
样本量
50–100 mg
技术
Silica technology
产量
Varies
性能
使用miRNeasy Mini Kit纯化含有miRNA的总RNA,可用于与管家基因或其他目的mRNA进行miRNA表达水平的直接比较。对于某些比较灵敏的下游应用,还需要富集得到不含有大分子RNA的miRNA组分。miRNeasy Mini Kit可高效富集至少含18个核苷酸以上的RNA。相比于使用其他试剂盒纯化的样本,使用miRNeasy Mini Kit纯化后的小RNA更清晰可见(参见Effective enrichment of small RNA)。miRNeasy Kits可从组织和细胞中纯化RNA,即使初始样本量较低也可确保高效纯化。随着纯化RNA的细胞或组织量的降低,CT值呈线性增长,说明可从较大范围的初始样本中高效纯化miRNA(参见Effective purification from a range of starting amounts)。
miRNeasy Mini Kit将苯酚异硫酸胍样本裂解技术与硅胶膜总RNA纯化技术相结合。该试剂盒包含的QIAzol Lysis Reagent,为苯酚与异硫酸胍的单相溶液,用于促进组织的裂解并抑制RNases,同时除去有机溶剂萃取产物中的绝大部分细胞DNA以及蛋白质。
操作流程
miRNeasy Mini Kit可纯化18个核苷酸(nt)以上的总RNA,也可分别纯化富集后的miRNA组分和总RNA(>200 nt)组分(参见miRNeasy procedures)。单独纯化的富集后的miRNA组分可能需要减弱背景干扰,以便用于某些比较灵敏的下游应用。在这种特定情况下,对miRNA和RNA(<200 nt)进行富集需要RNeasy MinElute Cleanup Kit。 miRNeasy Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化含有miRNA的总RNA。独创的QIAcube全自动核酸纯化仪应用先进技术处理QIAGEN离心柱,实现低通量样本自动化制备与实验室流程的无缝结合。使用QIAcube全自动核酸纯化仪制备样本与手工操作步骤相同(即裂解、结合、洗涤和洗脱),确保使用miRNeasy Mini Kit能持续纯化高品质的RNA。更多关于自动化流程的信息,参见相关的实验方案。