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- 2025年07月16日
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江西江南纯生物试剂有限公司
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34
- 适应物种：
人/植物/小鼠/大鼠/动物
UBC试剂盒夹心法试验测定报告单对ELISA试验的影响
※ ELISA试剂盒酶标仪给出的数值为灵敏波长下的吸光度值与十分感波长下的吸光度值的差。以软板为载体的实验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。ELISA试剂盒比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔。
※ 所谓的单波长比色等于一般的以对显色具有zui大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定；而双波长双色则酶标仪在灵敏波长如450nm和非灵敏波长630nm下各测定一次，
※ 灵敏波上下的吸光度测定值为样本测定酶反响特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、尘埃等脏物所致的吸光度之和；非灵敏波长下测定即改变波长至必定值，ELISA试剂盒使得样本测定酶反响特异显色的吸光度值为零，此刻测得的吸光度即为脏物的吸光度值。
※ 以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有运用，ELISA试剂盒而前者比色波长为450nm，后者为492nm，滤光片需依据请求随时替换。
UBC试剂盒夹心法的测定值
由于ELISA试剂盒测定中单个空缺孔的非特异吸收上有必定程度的不确定性，也就是说每次测定或同次测定空缺孔方位的不一样均有也许得到不一样吸光度测定值，
所以在ELISA测定比色时，是运用双波长比色。因而双波长比色测定具有能扫除由微滴板自身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、尘埃等对特异显色测定吸光度的影响的利益。
ELISA试剂盒比色成果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按划定用吸光度（absorbence，A），两者意义一样。
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文献和实验针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
)，或者转化1 μmol的有关基团的酶量。 2) ELISA试剂盒检测原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法(图A)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图B)等等。 抗体
呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量。 竞争法 ELISA 不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用比色计测定，读出 S、P和 N 的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照 A 值，现举某种检测抗 HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗 HBc 的复钙人血浆，阳性对照中抗HBc含量为 125±1 00u/ml。每次试验设
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