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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格
- 英文名：
Sulforhodamine B Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
500T
培养操作步骤：
1．磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格
英文名称：Sulforhodamine B Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：500T
发货周期：1～3天
磺酰罗丹明是一种能与生物大分子的碱性氨基酸结合的水溶性蛋白染料，其结合于细胞中的量的多少可以反映总蛋白量进而反映细胞数的多少。在515nm波长处的OD值与活细胞数呈良好的线性关系。
操作方法
1.以96孔细胞培养板为例说明
2.从细胞培养箱内取出待测96孔细胞培养板，弃去上清；
3.小心加入固定液，每孔100ul，4℃孵育1小时；弃去固定液；
4.加入洗涤液A，每孔100ul，室温下静置30秒，弃去洗涤液A；重复步骤4；
5.加入染色液，每孔50ul，室温下避光孵育15分钟；弃去染色液；
6.加入洗涤液B，每孔100ul，弃去洗涤液B，此步骤需快速完成；
7.重复步骤85-10次，直至把多余染料洗尽为止；
8.加入溶解液，每孔100ul，室温下避光孵育5分钟；
9.在波长515nm处，读取光吸收值；
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
2-(1H-咪唑-1-基)盐酸盐碳酸铜/盐基性碳酸铜/式碳酸铜/Cupric subcarbonate
1-Boc-4-啶酸铜丝/铜/电解铜/Copper
4-溴-3,6-哒嗪二铜片/铜/电解铜/Copper
依法韦仑铜粉/铜/电解铜/Copper
2-[(2,4-二基)基]-1H-并咪唑硬脂酸镁/十八酸镁/二式硬脂酸镁/Magnesium stearate
N-[1-[5-O-[二(4-氧基)基]-2-脱氧-2--BETA-D-阿拉伯糖基]柠檬酸镁/枸橼酸镁/Magnesium citrate tetradecahydrate
1-BOC-4-啶酸镁/酸镁/酸镁四水物/Magnesium acetate tetrahydrate
N,N-二基四镁/三水磷酸镁/二式盐/Magnesium phosphate dibasic trihydrate
2--4-羟基-5-嘧啶镁/苛性镁石/轻烧镁砂/Magnesum hydroxide
1,5-二基-2-基镁/二镁/Magnesium fluoride
磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格Sarcosine Oxidase肌酶5克BR，5u/ul，99%
Sarcosine methyl ester HC1N-基基酯盐盐5克BR，99%
Sarcosine ethyl ester HC1N-基基酯盐盐1克BR，99%
SarcosineN-基甘25克BR，99%
Saponin皂苷250毫升CP，
Samarium oxide三二钐10克BR，
Sallcylic acid柳100克CP
SalicylanilideN-水杨酰500毫克高，
Salicylaldoxime邻羟基肟100毫克CP，99%
Salicyl alcohol2-羟基25克3N
Saikosaponin D柴胡皂甙D25克BR，粘度1000 mPa.s
Saikosaponin C柴胡皂甙C10克BR，粘度500 mPa.s
Saikosaponin B1柴胡皂甙B1100克BR，粘度200 mPa.s
Saikosaponin A柴胡皂甙A25克BR，粘度100 mPa.s
SAHHS-腺苷高半胱水解酶100毫克BR，20u/ul
1．磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格英文名称：Sulforhodamine B Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：500T
发货周期：1～3天
磺酰罗丹明是一种能与生物大分子的碱性氨基酸结合的水溶性蛋白染料，其结合于细胞中的量的多少可以反映总蛋白量进而反映细胞数的多少。在515nm波长处的OD值与活细胞数呈良好的线性关系。
操作方法
1.以96孔细胞培养板为例说明
2.从细胞培养箱内取出待测96孔细胞培养板，弃去上清；
3.小心加入固定液，每孔100ul，4℃孵育1小时；弃去固定液；
4.加入洗涤液A，每孔100ul，室温下静置30秒，弃去洗涤液A；重复步骤4；
5.加入染色液，每孔50ul，室温下避光孵育15分钟；弃去染色液；
6.加入洗涤液B，每孔100ul，弃去洗涤液B，此步骤需快速完成；
7.重复步骤85-10次，直至把多余染料洗尽为止；
8.加入溶解液，每孔100ul，室温下避光孵育5分钟；
9.在波长515nm处，读取光吸收值；
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
2-(1H-咪唑-1-基)盐酸盐碳酸铜/盐基性碳酸铜/式碳酸铜/Cupric subcarbonate
1-Boc-4-啶酸铜丝/铜/电解铜/Copper
4-溴-3,6-哒嗪二铜片/铜/电解铜/Copper
依法韦仑铜粉/铜/电解铜/Copper
2-[(2,4-二基)基]-1H-并咪唑硬脂酸镁/十八酸镁/二式硬脂酸镁/Magnesium stearate
N-[1-[5-O-[二(4-氧基)基]-2-脱氧-2--BETA-D-阿拉伯糖基]柠檬酸镁/枸橼酸镁/Magnesium citrate tetradecahydrate
1-BOC-4-啶酸镁/酸镁/酸镁四水物/Magnesium acetate tetrahydrate
N,N-二基四镁/三水磷酸镁/二式盐/Magnesium phosphate dibasic trihydrate
2--4-羟基-5-嘧啶镁/苛性镁石/轻烧镁砂/Magnesum hydroxide
1,5-二基-2-基镁/二镁/Magnesium fluoride
磺酰罗丹明B/SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒规格Sarcosine Oxidase肌酶5克BR，5u/ul，99%
Sarcosine methyl ester HC1N-基基酯盐盐5克BR，99%
Sarcosine ethyl ester HC1N-基基酯盐盐1克BR，99%
SarcosineN-基甘25克BR，99%
Saponin皂苷250毫升CP，
Samarium oxide三二钐10克BR，
Sallcylic acid柳100克CP
SalicylanilideN-水杨酰500毫克高，
Salicylaldoxime邻羟基肟100毫克CP，99%
Salicyl alcohol2-羟基25克3N
Saikosaponin D柴胡皂甙D25克BR，粘度1000 mPa.s
Saikosaponin C柴胡皂甙C10克BR，粘度500 mPa.s
Saikosaponin B1柴胡皂甙B1100克BR，粘度200 mPa.s
Saikosaponin A柴胡皂甙A25克BR，粘度100 mPa.s
SAHHS-腺苷高半胱水解酶100毫克BR，20u/ul
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文献和实验相关实验
波长590 nm进行荧光读取。最佳的读取可提供最大的动态范围、最佳的线性度以及最小的标准偏差。 3.对数据进行作图。 细胞增殖检测 用MTT细胞生长检测试剂盒(CT01)检测增殖情况，用AldeRed ALDH检测试剂盒(SCR150)分析醛脱氢酶 (ALDH)表达情况。 肿瘤干细胞表达醛脱氢酶(ALDH)水平升高。AldeRed™ ALDH检测试剂盒可使用ALDH红移荧光底物基于醛脱氢酶(ALDH)表达进行活肿瘤干细胞鉴定和分离，允许同时使用包括GFP细胞系在内的绿色荧光报告物。 1.
，不依赖于其它两种细胞死亡机理，如杀伤T细胞的细胞毒性作用。 还有一种情况，一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动（代谢、生长、发育、分化）的一个必要部分；似乎带有“牺牲局部，保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡，明显地受遗传控制，称为细胞凋亡。 凋亡（Apoptosis）则是程序性的、正常的细胞死亡，是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程，无论从形态学、生物学还是生化的特征来说，都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老
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