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抗荧光淬灭封片液(含Hoech
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抗荧光淬灭封片液(含Hoechst 33342和PI)
一年
上海信裕生物科技有限公司
-20℃避光保存,一年有效。
5ml;25ml
信裕生物生产的抗荧光淬灭封片液(含Hoechst 33342和PI) (Antifade Mounting Medium with Hoechst 33342 and Propidium Iodide)是一种含有细胞核蓝色荧光染料Hoechst 33342和红色荧光染料PI并能减缓荧光淬灭的封片试剂。本封片液不仅可以减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭,还能在封片的同时完成Hoechst 33342和PI染色。本封片液含Hoechst 33342。Hoechst 33342,即2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O•3HCl•3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测和常规的细胞核荧光染色,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342的最大激发光波长为346nm,最大发射光波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后形成Hoechst 33342-DNA复合物,最大激发光波长为350nm,最大发射光波长为461nm。Propidium Iodide简称PI,中文名为碘化丙啶,是一种可对DNA和RNA染色的核酸染色试剂,它是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA或RNA后形成PI-DNA或PI-RNA复合物,发出红色荧光。碘化丙啶PI是一种深红色的固体粉末,分子式为C27H34I2N4,分子668.4,CAS number为25535-16-4。PI-DNA复合物的激发光和发射光波长分别为535nm和615nm。Hoechst 33342-DNA复合物和PI-DNA复合物的激发光谱和发射光谱参考图1。
图1. Hoechst 33342-DNA复合物(左)和PI-DNA复合物(右)的激发光谱和发射光谱。
尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对细胞核等染色,因此常和Hoechst 33342结合用于细胞凋亡(apoptosis)和细胞坏死(necrosis)的检测。PI也可用于普通细胞通透后的细胞核染色。本产品用于细胞染色的效果图参考图2。
图2. 诱导坏死的HeLa细胞使用本产品染色效果图。左图是明场下HeLa细胞形态图;中间是荧光显微镜下观察到的Hoechst 33342(蓝)和PI(红)单独染色HeLa细胞核效果图;右侧图是Hoechst 33342(蓝)和PI(红)双重染色的效果图,部分细胞被PI染成红色,PI染成红色的细胞即为坏死细胞。
本产品含有Hoechst 33342和PI,可同时完成Hoechst 33342和PI染色和封片,并能减缓荧光淬灭,实验操作特别简单,只需在封片时用移液器滴一滴本产品在样品上,盖上盖玻片即可完成操作。按照每个样品封片需要50微升计算,5ml本产品足够用于100个样品的细胞核染色和封片,25ml本产品可以用于500个样品的细胞核染色和封片。
包装清单:
保存条件:-20℃避光保存,一年有效。
注意事项:需自备盖玻片与载玻片,也可向信裕生物订购盖玻片(FCGF18)(FCGF20)(FCGF22)(FCGF24)(FCGF30)(FCGF32)(FCGF40)(FCGF50)(FCGF60)与载玻片(FSL004/FSL005)(FSL006)(FSL011)(FSL012)(FSL051)。荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。可以向信裕生物选购各种型号的载玻片存储盒(FBX001)(FBX002)(FBX003)(FBX005)(FBX011)(FBX012)(FBX024)(FBX025)(FBX049)(FBX050)(FBX099)(FBX100)。本产品中Hoechst 33342和PI的浓度经过信裕生物的优化,确保可以满足各种常规染色的需要。如需单独使用特定浓度的Hoechst 33342,请选购信裕生物的Hoechst 33342 (C1022)。如需染色活细胞或培养的组织,请选购信裕生物的Hoechst 33342活细胞染色液(100X) (C1027、C1028或C1029),效果更佳。如需使用特定浓度的PI,请选购信裕生物的PI(ST511或ST512)。为了达到良好的染色和鉴定效果,建议在染色后20-30 min内完成检测。在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光。Hoechst 33342和PI对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:1. 贴壁细胞样品:a. 染色完毕后,吸尽液体。b. 滴一滴本产品于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片液,尽量避免气泡。c. 随后即可在荧光显微镜下观察细胞样品。2. 组织切片:a. 染色完毕后,吸尽液体。b. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于组织切片上,盖上盖玻片,让切片接触封片液,尽量避免气泡。c. 随后即可在荧光显微镜下观察组织切片。3. 其它样品:其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
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