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Quickblock™封闭液(
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Quickblock™封闭液(10X)
一年
上海信裕生物科技有限公司
4℃保存,一年有效。长期不使用可以-20℃保存。稀释至 1X溶液后,请4℃保存,并在一个月内使用完毕。
100ml
信裕生物生产的QuickBlock™封闭液(QuickBlock™ Blocking Buffer)是最新一代的快速高效封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱 脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,可以用于Western blot (WB)、 Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC)等实验 中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品为10倍浓缩(10X)溶液,不含去垢剂。QuickBlock™封闭液快速高效。封闭时间通常仅需 5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速封闭液相比 ,显示出更强的信噪比(参考图1)。QuickBlock™封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清 和白蛋白,确保极高的信噪比。QuickBlock™封闭液兼容性好,兼容辣根过氧化物酶 (Horseradish peroxidase, HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或 AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。QuickBlock™封闭液(10X)使用灵活。本产品为 10X溶液,可以根据实验需要使用PBS、TBS或其它适当溶液稀释至1X,即可用于相关实验。同时也可以 根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一 抗或二抗的稀释。本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见图1。在相 同样品和实验条件下,仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时,信裕生物的QuickBlock™封闭液封 闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景,而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。图1. QuickBlock™封闭液与BSA及国外同类产品的封闭效果比较。每组实验从左到右依次为:5 μl蛋白Marker,2.5 μg蛋白量的HeLa细胞裂解液,5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于Antibody A,QuickBlock™封闭液比BSA和国 外同类产品具有更低的背景,并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于Antibody B,QuickBlock™封闭液比 BSA具有更低的背景,和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同 而存在差异,图中数据仅供参考。按照每张膜封闭需要5-10ml QuickBlock™封闭液(1X)计算,一个包装的本产 品可以封闭100-200张膜。包装清单:
保存条件:4℃保存,一年有效。长期不使用可以-20℃保存。稀释至 1X溶液后,请4℃保存,并在一个月内使用完毕。注意事项:本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比 很高的一抗,例如一些内参抗体,本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用过的封闭 液混合。通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对 于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也完全可以 4℃封闭过夜。由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要 根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免 膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行 到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。 在背景较高的情况下,为进一步提高信噪比,本产品稀释至1X后可以自行添加 Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品, 不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:1. QuickBlock™封闭液(10X) 的稀释根据实验需要,使用PBS、TBS或含有0.05%-0.1% Tween-20或Triton X-100的PBS或TBS稀释 QuickBlock™封闭液(10X)至1X。2. Western Blot中膜的封闭a. 完成转膜后,用Western洗涤液洗涤蛋白膜1-2分钟。b. 根据膜的大小,在平皿或者其它适当容器中倒入一定体积的QuickBlock™封闭液(1X),确保封 闭液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的western,一张约6.6×8.5cm的膜推荐使用约 10ml左右的封闭液。c. 用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在QuickBlock™封闭液(1X)中,使封闭液完全浸没膜,置于 水平摇床上封闭约10分钟(通常5-15分钟均可;经多种抗体的测试封闭10分钟的效果很多 时候会显著优于常规的BSA封闭1小时的效果)。d. 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
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