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pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白)
一年
上海信裕生物科技有限公司
-20℃保存。
1μg;100μg
pCMV-N-CFP是信裕生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含CFP(Cyan Fluorescent Protein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个CFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达量和细胞内定位,也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-CFP质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
CFP | 677-1393 |
Multiple cloning site | 1394-1483 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
SV40 polyA signal | 1536-1919 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
bla promoter | 2388-2512 |
SV40 promoter | 2532-2870 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
pUC origin | 4284-4951 |
pCMV-N-CFP质粒(5003bp)的图谱如下:
pCMV-N-CFP的多克隆位点的详细图谱如下:
SacICFP | |||||||||
651 | GAGCTCTAGC | GCTACCGGTC |
|
TGAGCAAGGG |
|
||||
CTCGAGATCG | CGATGGCCAG |
|
ACTCGTTCCC |
|
|||||
701 | TTCACCGGGG | TGGTGCCCAT | CCTGGTCGAG | CTGGACGGCG |
|
||||
AAGTGGCCCC | ACCACGGGTA | GGACCAGCTC | GACCTGCCGC |
|
|||||
751 | CCACAGGTTC | AGCGTGTCCG | GCGAGGGCGA | GGGCGATGCC |
|
||||
GGTGTCCAAG | TCGCACAGGC | CGCTCCCGCT | CCCGCTACGG |
|
|||||
801 | AGCTGACCCT | GAAGTTCATC | TGCACCACCG | GCAAGCTGCC |
|
||||
TCGACTGGGA | CTTCAAGTAG | ACGTGGTGGC | CGTTCGACGG |
|
|||||
851 | CCCACCCTCG | TGACCACCCT | GACCTGGGGC | GTGCAGTGCT |
|
||||
GGGTGGGAGC | ACTGGTGGGA | CTGGACCCCG | CAGGTCACGA |
|
|||||
901 | CCCCGACCAC | ATGAAGCAGC | ACGACTTCTT | CAAGTCCGCC |
|
||||
GGGGCTGGTG | TACTTCGTCG | TGCTGAAGAA | GTTCAGGCGG |
|
|||||
951 | GCTACGTCCA | GGAGCGTACC | ATCTTCTTCA | AGGACGACGG |
|
||||
GCTACGTCCA | GGAGCGTACC | ATCTTCTTCA | AGGACGACGG |
|
|||||
1001 | ACCCGCGCCG | AGGTGAAGTT | CGAGGGCGAC | ACCCTGGTGA |
|
||||
TGGGCGCGGC | TCCACTTCAA | GCTCCCGCTG | TGGGACCACT |
|
|||||
1051 | GCTGAAGGGC | ATCGACTTCA | AGGAGGACGG | CAACATCCTG |
|
||||
CGACTTCCCG | TAGCTGAAGT | TCCTCCTGCC | GTTGTAGGAC |
|
|||||
1101 | TGGAGTACAA | CTACATCAGC | CACAACGTCT | ATATCACCGC |
|
||||
ACCTCATGTT | GATGTAGTCG | GTGTTGCAGA | TATAGTGGCG |
|
|||||
1151 | AAGAACGGCA | TCAAGGCCCA | CTTCAAGATC | CGCCACAACA |
|
||||
TTCTTGCCGT | AGTTCCGGGT | GAAGTTCTAG | GCGGTGTTGT |
|
|||||
1201 | CAGCGTGCAG | CTCGCCGACC | ACTACCAGCA | GAACACCCCC |
|
||||
GTCGCACGTC | GAGCGGCTGG | TGATGGTCGT | CTTGTGGGGG |
|
|||||
1251 | GCCCCGTGCT | GCTGCCCGAC | AACCACTACC | TGAGCACCCA |
|
||||
CGGGGCACGA | CGACGGGCTG | TTGGTGATGG | ACTCGTGGGT |
|
|||||
1301 | AGCAAAGACC | CCAACGAGAA | GCGCGATCAC | ATGGTCCTGC |
|
||||
TCGTTTCTGG | GGTTGCTCTT | CGCGCTAGTG | TACCAGGACG |
|
|||||
BamHI HindIII | |||||||||
1351 | GACCGCCGCC | GGGATCACTC | TCGGCATGGA | CGAGCTGTAC |
|
||||
CTGGCGGCGG | CCCTAGTGAG | AGCCGTACCT | GCTCGACATG |
|
|||||
PstI EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI SpeI | |||||||||
1401 | AGCTTCTGCA | GGAATTCGAT | ATCGTCGACA | GATCTCTCGA | GTCTAGAACT | ||||
TCGAAGACGT | CCTTAAGCTA | TAGCAGCTGT | CTAGAGAGCT | CAGATCTTGA | |||||
ApaI | |||||||||
1451 | AGTGGGCCCG | GTACCTTAAT | TAATTAAGGT | ACC | |||||
TCACCCGGGC | CATGGAATTA | ATTAATTCCA | TGG |
pCMV-N-CFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-CFP)包括:
AclI | AflII | AhdI | AscI | AsiSI | BaeI |
BbvCI | BlpI | BsmBI | BsiWI | BsmBI | BspEI |
BssHII | BstEII | BstXI | BstZ17I | EarI | EcoNI |
NotI | NruI | PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI |
PspXI | SacII | SapI | SbfI | ScaI | SgrAI |
SwaI | TspMI | XcmI | XmaI | XmnI |
pCMV-N-CFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-CFP once)包括:
NdeI | CA`TA,TG | 240 | ApaI | G,GGCC`C | 1454 | |
SnaBI | TAC|GTA | 346 | PvuI | CG,AT`CG | 1534 | |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | BclI | T`GATC,A | 1690 | |
NheI | G`CTAG,C | 597 | MfeI | C`AATT,G | 1783 | |
BmtI | G,CTAG`C | 597 | HpaI | GTT|AAC | 1796 | |
SacI | G,AGCT`C | 651 | MluI | A`CGCG,T | 1919 | |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2080 | |
AfeI | AGC|GCT | 660 | DraIII | CAC,NNN`GTG` | 2146 | |
AgeI | A`CCGG,T | 664 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2805 | |
BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 765 | StuI | AGG|CCT | 2854 | |
BsrGI | T`GTAC,A | 1386 | ClaI | AT`CG,AT | 2873 | |
BamHI | G`GATC,C | 1394 | BspDI | AT`CG,AT | 2873 | |
HindIII | A`AGCT,T | 1400 | EagI | C`GGCC,G | 2939 | |
PstI | C,TGCA`G | 1406 | KasI | G`GCGC,C | 3032 | |
EcoRI | G`AATT,C | 1412 | PluTI | G,GCGC`C | 3032 | |
EcoRV | GAT|ATC | 1420 | NarI | GG`CG,CC | 3033 | |
SalI | G`TCGA,C | 1424 | SfoI | GGC|GCC | 3034 | |
AccI | GT`MK,AC | 1425 | MscI | TGG|CCA | 3115 | |
BglII | A`GATC,T | 1430 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3151 | |
BsoBI | C`YCGR,G | 1436 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3151 | |
PaeR7I | C`TCGA,G | 1436 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3264 | |
AvaI | C`YCGR,G | 1436 | RsrII | CG`GWC,CG | 3549 | |
XhoI | C`TCGA,G | 1436 | BstBI | TT`CG,AA | 3715 | |
XbaI | T`CTAG,A | 1442 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4022 | |
SpeI | A`CTAG,T | 1448 | ApaLI | G`TGCA,C | 4637 | |
PspOMI | G`GGCC,C | 1454 |
pCMV-N-CFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-CFP primer (1284-1303): 5′-GCACCCAGTCCGCCCTGAGC-3′
T7 primer (1503-1524): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
pCMV-N-CFP的全序列信息:D2703 pCMV-N-CFP-seq.txt
pCMV-N-CFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-N-CFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
XY-2703-1μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
XY-2703-100μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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