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pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白)
一年
上海信裕生物科技有限公司
-20℃保存。
1μg;100μg
pCMV-C-mCherry是信裕生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-mCherry质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
Multiple cloning site | 651-736 |
mCherry | 741-1451 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1501-1522 |
SV40 polyAsignal | 1534-1917 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2055-2361 |
bla promoter | 2386-2510 |
SV40 promoter | 2530-2868 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2903-3694 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3695-4153 |
pUC origin | 4282-4949 |
pCMV-C-mCherry质粒(5001bp)的图谱如下:
pCMV-C-mCherry的多克隆位点的详细图谱如下:
SmaI | |||||
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII | |||||
651 | GAGCTCCACC | GCGGTGGCGG | CCGCTCTAGC | CCGGGCGGAT | CCAAGCTTCT |
CTCGAGGTGG | CGCCACCGCC | GGCGAGATCG | GGCCCGCCTA | GGTTCGAAGA | |
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI mCherry | |||||
701 | GCAGGAATTC | GATATCGTCG | ACAGATCTCT | CGAGTCTAGA | ATGGTGAGCA |
CGTCCTTAAG | CTATAGCAGC | TGTCTAGAGA | GCTCAGATCT | TACCACTCGT | |
751 | AGGGCGAGGA | GGATAACATG | GCCATCATCA | AGGAGTTCAT | GCGCTTCAAG |
TCCCGCTCCT | CCTATTGTAC | CGGTAGTAGT | TCCTCAAGTA | CGCGAAGTTC | |
801 | GTGCACATGG | AGGGCTCCGT | GAACGGCCAC | GAGTTCGAGA | TCGAGGGCGA |
CACGTGTACC | TCCCGAGGCA | CTTGCCGGTG | CTCAAGCTCT | AGCTCCCGCT | |
851 | GGGCGAGGGC | CGCCCCTACG | AGGGCACCCA | GACCGCCAAG | CTGAAGGTGA |
CCCGCTCCCG | GCGGGGATGC | TCCCGTGGGT | CTGGCGGTTC | GACTTCCACT | |
901 | CCAAGGGTGG | CCCCCTGCCC | TTCGCCTGGG | ACATCCTGTC | CCCTCAGTTC |
GGTTCCCACC | GGGGGACGGG | AAGCGGACCC | TGTAGGACAG | GGGAGTCAAG | |
951 | ATGTACGGCT | CCAAGGCCTA | CGTGAAGCAC | CCCGCCGACA | TCCCCGACTA |
TACATGCCGA | GGTTCCGGAT | GCACTTCGTG | GGGCGGCTGT | AGGGGCTGAT | |
1001 | CTTGAAGCTG | TCCTTCCCCG | AGGGCTTCAA | GTGGGAGCGC | GTGATGAACT |
GAACTTCGAC | AGGAAGGGGC | TCCCGAAGTT | CACCCTCGCG | CACTACTTGA | |
1051 | TCGAGGACGG | CGGCGTGGTG | ACCGTGACCC | AGGACTCCTC | CCTGCAGGAC |
AGCTCCTGCC | GCCGCACCAC | TGGCACTGGG | TCCTGAGGAG | GGACGTCCTG | |
1101 | GGCGAGTTCA | TCTACAAGGT | GAAGCTGCGC | GGCACCAACT | TCCCCTCCGA |
CCGCTCAAGT | AGATGTTCCA | CTTCGACGCG | CCGTGGTTGA | AGGGGAGGCT | |
1151 | CGGCCCCGTA | ATGCAGAAGA | AGACCATGGG | CTGGGAGGCC | TCCTCCGAGC |
GCCGGGGCAT | TACGTCTTCT | TCTGGTACCC | GACCCTCCGG | AGGAGGCTCG | |
1201 | GGATGTACCC | CGAGGACGGC | GCCCTGAAGG | GCGAGATCAA | GCAGAGGCTG |
CCTACATGGG | GCTCCTGCCG | CGGGACTTCC | CGCTCTAGTT | CGTCTCCGAC | |
1251 | AAGCTGAAGG | ACGGCGGCCA | CTACGACGCT | GAGGTCAAGA | CCACCTACAA |
TTCGACTTCC | TGCCGCCGGT | GATGCTGCGA | CTCCAGTTCT | GGTGGATGTT | |
1301 | GGCCAAGAAG | CCCGTGCAGC | TGCCCGGCGC | CTACAACGTC | AACATCAAGT |
CCGGTTCTTC | GGGCACGTCG | ACGGGCCGCG | GATGTTGCAG | TTGTAGTTCA | |
1351 | TGGACATCAC | CTCCCACAAC | GAGGACTACA | CCATCGTGGA | ACAGTACGAA |
ACCTGTAGTG | GAGGGTGTTG | CTCCTGATGT | GGTAGCACCT | TGTCATGCTT | |
1401 | CGCGCCGAGG | GCCGCCACTC | CACCGGCGGC | ATGGACGAGC | TGTACAAGTA |
GCGCGGCTCC | CGGCGGTGAG | GTGGCCGCCG | TACCTGCTCG | ACATGTTCAT | |
ApaI | |||||
1451 | GGGGCCCGGT | ACCTTAATTA | ATTAAGGTAC | CAGGTAAGTG | TACCCAATTC |
CCCCGGGCCA | TGGAATTAAT | TAATTCCATG | GTCCATTCAC | ATGGGTTAAG |
pCMV-C-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mCherry)包括:
AclI | AfeI | AflII | AgeI | AscI | AsiSI | BaeI |
BcgI | BlpI | BmgBI | BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI |
BssHII | BstZ17I | EarI | EcoNI | FseI | NruI | PmeI |
PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SapI | ScaI | SpeI |
SwaI | XmnI |
pCMV-C-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:
NdeI | CA`TA,TG | 240 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 1177 | |
SnaBI | TAC|GTA | 346 | Bpu10I | CC`TNA,GC | 1282 | |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 380 | BbvCI | CC`TCA,GC | 1282 | |
NheI | G`CTAG,C | 597 | BsgI | GTGCAG(N)14,NN` | 1333 | |
BmtI | G,CTAG`C | 597 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 1422 | |
SacI | G,AGCT`C | 651 | XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 1426 | |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | BsrGI | T`GTAC,A | 1441 | |
BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 659 | PspOMI | G`GGCC,C | 1452 | |
SacII | CC,GC`GG | 660 | ApaI | G,GGCC`C | 1452 | |
NotI | GC`GGCC,GC | 668 | PvuI | CG,AT`CG | 1532 | |
TspMI | C`CCGG,G | 680 | BclI | T`GATC,A | 1688 | |
XmaI | C`CCGG,G | 680 | MfeI | C`AATT,G | 1781 | |
SmaI | CCC|GGG | 682 | HpaI | GTT|AAC | 1794 | |
BamHI | G`GATC,C | 687 | BtsI | GCAGTG,NN` | 1868 | |
HindIII | A`AGCT,T | 693 | MluI | A`CGCG,T | 1917 | |
EcoRI | G`AATT,C | 705 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2144 | |
EcoRV | GAT|ATC | 713 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2803 | |
SalI | G`TCGA,C | 717 | ClaI | AT`CG,AT | 2871 | |
AccI | GT`MK,AC | 718 | BspDI | AT`CG,AT | 2871 | |
BglII | A`GATC,T | 723 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3149 | |
XhoI | C`TCGA,G | 729 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3149 | |
PaeR7I | C`TCGA,G | 729 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3262 | |
XbaI | T`CTAG,A | 735 | RsrII | CG`GWC,CG | 3547 | |
AhdI | GACNN,N`NNGTC | 934 | BstBI | TT`CG,AA | 3713 | |
SbfI | CC,TGCA`GG | 1092 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4020 | |
BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 1176 | PciI | A`CATG,T | 4949 |
pCMV-C-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-mCherry primer (852-873): 5′CCTCGTAGGGGCGGCCCTCGCC-3′
pCMV-C-mCherry的全序列信息:D2628 pCMV-C-mCherry-seq.txt
pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
XY-2628-1μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
XY-2628-100μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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