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pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白)
一年
上海信裕生物科技有限公司
-20℃保存。
1μg;100μg
pCMV-C-CFP是信裕生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含CFP(Cyan FluorescentProtein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个CFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似,可尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-CFP质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
Multiple cloning site | 651-740 |
CFP | 741-1460 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
SV40 polyA signal | 1543-1926 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
bla promoter | 2395-2519 |
SV40 promoter | 2539-2877 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
pUC origin | 4291-4958 |
pCMV-C-CFP质粒(5010bp)的图谱如下:
pCMV-C-CFP的多克隆位点的详细图谱如下:
SmaIPstI | |||||||
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII | |||||||
651 | GAGCTCCACC | GCGGTGGCGG | CCGCTCTAGC | CCGGGCGGAT | CCAAGCTTCT | ||
CTCGAGGTGG | CGCCACCGCC | GGCGAGATCG | GGCCCGCCTA | GGTTCGAAGA | |||
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI CFP | |||||||
701 | GCAGGAATTC | GATATCGTCG | ACAGATCTCT | CGAGTCTAGA |
|
||
CGTCCTTAAG | CTATAGCAGC | TGTCTAGAGA | GCTCAGATCT |
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751 | AGGGCGAGGA | GCTGTTCACC | GGGGTGGTGC | CCATCCTGGT |
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TCCCGCTCCT | CGACAAGTGG | CCCCACCACG | GGTAGGACCA |
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801 | GGCGACGTAA | ACGGCCACAG | GTTCAGCGTG | TCCGGCGAGG |
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CCGCTGCATT | TGCCGGTGTC | CAAGTCGCAC | AGGCCGCTCC |
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|||
851 | TGCCACCTAC | GGCAAGCTGA | CCCTGAAGTT | CATCTGCACC |
|
||
ACGGTGGATG | CCGTTCGACT | GGGACTTCAA | GTAGACGTGG |
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|||
901 | TGCCCGTGCC | CTGGCCCACC | CTCGTGACCA | CCCTGACCTG |
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||
ACGGGCACGG | GACCGGGTGG | GAGCACTGGT | GGGACTGGAC |
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|||
951 | TGCTTCAGCC | GCTACCCCGA | CCACATGAAG | CAGCACGACT |
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||
ACGAAGTCGG | CGATGGGGCT | GGTGTACTTC | GTCGTGCTGA |
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|||
1001 | CGCCATGCCC | GAAGGCTACG | TCCAGGAGCG | TACCATCTTC |
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GCGGTACGGG | CTTCCGATGC | AGGTCCTCGC | ATGGTAGAAG |
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1051 | ACGGCAACTA | CAAGACCCGC | GCCGAGGTGA | AGTTCGAGGG |
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TGCCGTTGAT | GTTCTGGGCG | CGGCTCCACT | TCAAGCTCCC |
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|||
1101 | GTGAACCGCA | TCGAGCTGAA | GGGCATCGAC | TTCAAGGAGG |
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CACTTGGCGT | AGCTCGACTT | CCCGTAGCTG | AAGTTCCTCC |
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1151 | CCTGGGGCAC | AAGCTGGAGT | ACAACTACAT | CAGCCACAAC |
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||
GGACCCCGTG | TTCGACCTCA | TGTTGATGTA | GTCGGTGTTG |
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1201 | CCGCCGACAA | GCAGAAGAAC | GGCATCAAGG | CCCACTTCAA |
|
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GGCGGCTGTT | CGTCTTCTTG | CCGTAGTTCC | GGGTGAAGTT |
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|||
1251 | AACATCGAGG | ACGGCAGCGT | GCAGCTCGCC | GACCACTACC |
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||
TTGTAGCTCC | TGCCGTCGCA | CGTCGAGCGG | CTGGTGATGG |
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1301 | CCCCATCGGC | GACGGCCCCG | TGCTGCTGCC | CGACAACCAC |
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||
GGGGTAGCCG | CTGCCGGGGC | ACGACGACGG | GCTGTTGGTG |
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1351 | CCCAGTCCGC | CCTGAGCAAA | GACCCCAACG | AGAAGCGCGA |
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GGGTCAGGCG | GGACTCGTTT | CTGGGGTTGC | TCTTCGCGCT |
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|||
1401 | CTGCTGGAGT | TCGTGACCGC | CGCCGGGATC | ACTCTCGGCA |
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GACGACCTCA | AGCACTGGCG | GCGGCCCTAG | TGAGAGCCGT |
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ApaI | |||||||
1451 | GTACAAGTAA | GGGCCCGGTA | CCTTAATTAA | TTAAGGTACC |
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CATGTTCATT | CCCGGGCCAT | GGAATTAATT | AATTCCATGG |
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pCMV-C-CFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-CFP)包括:
AclI | AfeI | AflII | AgeI | AhdI | AscI | AsiSI |
BaeI | BbsI | BbvCI | BlpI | BmgBI | BsiWI | BsmBI |
BspEI | BspQI | BssHII | BstEII | BstZ17I | EarI | EcoNI |
FseI | NruI | PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI |
PspXI | SapI | SbfI | ScaI | SgrAI | SpeI | SwaI |
XcmI | XmnI |
pCMV-C-CFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-CFP once)包括:
NdeI | CA`TA,TG | 240 | PspOMI | G`GGCC,C | 1461 |
SnaBI | TAC|GTA | 346 | ApaII | G,GGCC`C | 1461 |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 380 | PvuI | CG,AT`CG | 1541 |
NheI | G`CTAG,C | 597 | BclI | T`GATC,A | 1697 |
BmtI | G,CTAG`C | 597 | MfeI | C`AATT,G | 1790 |
SacI | G,AGCT`C | 651 | HpaI | GTT|AAC | 1803 |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | MluI | A`CGCG,T | 1926 |
BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 659 | BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2087 |
SacII | CC,GC`GG | 660 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2153 |
NotI | GC`GGCC,GC | 668 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2812 |
TspMI | C`CCGG,G | 680 | StuI | AGG|CCT | 2861 |
XmaI | C`CCGG,G | 680 | ClaI | AT`CG,AT | 2880 |
SmaI | CCC|GGG | 682 | BspDI | AT`CG,AT | 2880 |
BamHI | G`GATC,C | 687 | KasI | G`GCGC,C | 3039 |
HindIII | A`AGCT,T | 693 | NarI | GG`CG,CC | 3040 |
PstI | C,TGCA`G | 699 | SfoI | GGC|GCC | 3041 |
EcoRI | G`AATT,C | 705 | PluTI | G,GCGC`C | 3039 |
EcoRV | GAT|ATC | 713 | MscI | TGG|CCA | 3122 |
SalI | G`TCGA,C | 717 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3158 |
AccI | GT`MK,AC | 718 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3158 |
BglII | A`GATC,T | 723 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3271 |
XhoI | C`TCGA,G | 729 | RsrII | CG`GWC,CG | 3556 |
PaeR7I | C`TCGA,G | 729 | BstBI | TT`CG,AA | 3722 |
XbaI | T`CTAG,A | 735 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4029 |
BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 829 | ApaLI | G`TGCA,C | 4644 |
BsrGI | T`GTAC,A | 1450 | PciI | A`CATG,T | 4958 |
pCMV-C-CFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-CFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-CFP的全序列信息:D2623 pCMV-C-CFP-seq.txt
pCMV-C-CFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
XY-2623-1μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
XY-2623-100μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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