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细胞丙二醛测定试剂盒(微板法)规格

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  • 上海研生
  • YSRIBIO-C0166
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  • 2025年07月13日
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    • 英文名

      Cell Malondialdehyde (MDA) assay kit (Colorimetric method)

    • CAS号

      详见说明书

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      400T

    培养操作步骤:
    1.细胞丙二醛测定试剂盒(微板法)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
    2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
    3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
    4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
    5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

    产品细节图片1中文名称:细胞丙二醛测定试剂盒(微板法)规格
    英文名称:Cell Malondialdehyde (MDA) assay kit (Colorimetric method)
    产品规格:400T
    发货周期:1~3天
    发货周期:1~3天

    检测指标:细胞丙二醛;MDA
    本试剂盒可测各种动物培养细胞等样本中丙二醛的含量。机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业的发展。
    产品优点如下:
    1、操作简便:可将试剂混合成单试剂操作,全程约50分钟,可测48例左右样本。
    2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放12个月有效,试剂配制后至少能存放6个月;呈色稳定,显色后24小时吸光度不变。
    6、适用于细胞样本。
    3、再现性好:批内CV=2.3%,批间CV=5.34%。
    4、回收试验: X =101.8%。
    5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
    6、适用于细胞样本。
    实验报告:
    一、分离与培养:
        1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
        3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
        5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
    二、免疫荧光鉴定:
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
        2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
        5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
        6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    注意事项:
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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    Insulin-like growth factor binding protein 1Manidipine-d4
    Insulin-like growth factor I ReceptorDesmethoxy Ranolazine-d5
    Insulin-like growth factor 4Coniferin
    Insulin-like growth factor 3(R)-Modafinil Carboxylate (S)-α-Methylbenzenemethanamine Salt
    Insulin-like growth factor 2 ReceptorN-Chloromethyl Olanzapine-d3 Chloride

     

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