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- JC-A80716
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 英文名：
M5 HiPer BLR (DE3) pLysS感受态细胞，增强质粒稳定性，提高表达量；减少本底表达
- 库存：
216
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
100ulx20
M5 HiPer BLR (DE3) pLysS感受态细胞，增强质粒稳定性，提高表达量；减少本底表达基本七点注意事项：
1、各种试剂禁忌常年续加
2、质控必须用高、中、低值三个样本每天随患者标本测定
3、抗凝剂的使用
4、校准液的正确使用
5、同一品牌不同批号的试剂不能混用
6、续加试剂后要重新定标，标准液即开即用
7、不同厂家的试剂禁用同一标准液定标
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文献和实验。 在保证质粒稳定性这一点上除了pETcoco的方法还有另一种方法就是将重组质粒转化进入含有T7 RNA聚合酶抑制剂的T7溶菌酶表达基因的菌株中，在含有pLysS的pLysE宿主菌内重组质粒的本底表达被进一步抑制，质粒可以更稳定地存在。 Novagen提供多种表达使用的菌株，为了提高表达量做出了各种改造，它们大致分为以下几个种类： 蛋白酶缺陷型 所有B菌株的衍生株都是lon蛋白酶和ompT蛋白酶缺陷型的，这包括有B834, BL21, BLR
酶表达基因的菌株中，在含有pLysS的pLysE宿主菌内重组质粒的本底表达被进一步抑制，质粒可以更稳定地存在。 Novagen提供多种表达使用的菌株，为了提高表达量做出了各种改造，它们大致分为以下几个种类： 蛋白酶缺陷型 所有B菌株的衍生株都是lon蛋白酶和ompT蛋白酶缺陷型的，这包括有B834,BL21,BLR,Origami™ B,Rosetta™和Tuner™。因此在纯化时可以保持蛋白的稳定不被降解。BL21(DE3)是应用最多的表达的表达菌株。另外它的衍生株BLR
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择，现系统地解答一下，供新手借鉴。
pLysS 和 pLyE 时调控会更严紧。 pLys 质粒编码 T7 溶菌酶，它是 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物，因此可降低其在未诱导细胞中转录目标基因的能力。 pLysS 宿主菌产生低量 T7 溶菌酶，而 pLysE 宿主菌产生更多酶，因此是最严紧控制的 λ DE3 溶原菌。 有 11 种不同DE3 溶原化宿主菌。使用最广泛的为 BL21 及其衍生菌株，它的优点在于缺失 lon 和 ompT 蛋白酶。 B834 菌株为甲硫氨酸营养缺陷型，因此可用 35 S- 甲硫氨酸和硒代甲硫氨酸对目标蛋白进行
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