10毫升离心管

高通量破碎组织提取核酸或蛋白质

敏感的物质时，低温状态的控制显得尤为关键。 以下破碎方法结合了仪器的使用，使高通量或低温破碎样品、提取内容物更便捷。文章最后分享了提取核酸和蛋白质的实验效果图。 注：由于样品的具体差异及实验要求的不同，下文数据部分请咨询厂家。 第一部分 破碎动物组织 1）样品：猪肌肉组织 2）仪器： Tissuelyser 多样品组织研磨机（品牌：上海净信）； 耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠 3）步骤： a. 取***克

操作篇：Western Blot 蛋白样品制备

液加 10 μ PMSF（100 mM），摇匀置于冰上。（PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。） 4.每瓶细胞加 400 μ 含 PMSF 的裂解液，于冰上裂解 30 min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 5.裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后用枪将细胞碎片和裂解液移至 1.5 ml 离心管中。（整个操作尽量在冰上进行。） 6.于 4℃ 下 12000rpm 离心 5 min。（提前开离心机预冷） 7.将离心后的上清

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 收集上清（约 30 ml）并加入 30 μg 的适当抗体，4 ℃ 摇动免疫沉淀物 1 h。 加入 0.9 ml 的蛋白质 A-Sepharose 悬液，4 ℃ 摇动免疫沉淀物 30 min。 用含 900 mmol/L NaCl 的 NETN 洗蛋白 A-Sepharose 混合物，再重复洗 5 次。最后，用 NETN 洗