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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 英文名:
M5 HiPer Annexin V-PE/7-AAD 凋亡检测试剂盒
- 库存:
206
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
50T
初步判断试剂的稳定性,可遵循以下几个原则:
① 无机化合物,只要妥善保管,包装完无损,可以长期使用。
② 容易氧化、容易潮解的物质,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
③ 有机小分子量化合物一般挥发性较强,包装的密闭性要,可以长时间保存。
④ 容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
⑤ 有机高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质腐败,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。
⑥ 基准物质、标准物质和高纯物质,原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长,一般情况下,产品必须在有效期内使用。
实验时 ,M5 HiPer Annexin V-PE/7-AAD 凋亡检测试剂盒记录事项:
1)所有的记录均应规范登记在册。
2)科研试剂的来源及测定值并注明是否在控。
3)所有实验的原始资料均应存档。
4)原始登记表应记录试剂来源、批号。
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 图Annexin V 检测细胞凋亡原理二、试剂盒组份
与Annexin V-FITC联合使用; 3. 7-AAD. 推荐与Annexin V-PE或者Annexin V-Biotin 联合使用; 4. 1X PBS 室温储存备用; 染色步骤 1、用预冷的PBS洗涤细胞两次,之后用1X的结合缓冲液重悬细胞, 调节细胞浓度到1X106Cells/ml; 2、取100μl调节好浓度的细胞悬液到5ml流式管底部; 3、加入Annexin V标记蛋白和相应
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