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-20℃ 至 -80℃
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12个月
- 英文名:
Human Neuropilin-1 / NRP1 / CD304 Protein (His & AVI Tag), Biotinylated
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
20 µg/100 µg
| 规格: | 20 µg | 产品价格: | ¥2980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 µg | 产品价格: | ¥6880.0 |
蛋白名称:Neuropilin-1蛋白, Neuropilin-1 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the human NRP1 (NP_001019799.1) (Met1-Lys644) was expressed with a c-terminal polyhistidine tagged AVI tag at the C-terminus. The expressed protein was biotinylated in vivo by the Biotin-Protein ligase (BirA enzyme) which is co-expressed.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 95 % as determined by SDS-PAGE.
蛋白活性:Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized VEGF165 (Cat:11066-HNAB) at 10 μg/mL (100 μL/well) can bind Human Neuropilin-1, Biotinylated (Cat:10011-H27H-B), the EC50 of Human Neuropilin-1, Biotinylated (Cat:10011-H27H-B) is 300-600 ng/mL.
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg protein as determined by the LAL method.
预测N端:Phe 22
蛋白分子量:The recombinant human NRP1 consists of 649 amino acids and predicts a molecular mass of 73.1 kDa.
蛋白NP号:NP_001019799.1
蛋白氨基酸序列:Met1-Lys644
蛋白标签:C-AVI & His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分,尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中,上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离,充分利用上游对下游的影响,对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签,His标签,GST标签等,不同的亲和标签选择不同的纯化方案;可能是可溶性表达,可能形成包涵体,可溶性的蛋白往往需要复杂的纯化步骤,而包涵体易于分离,纯度较高,但回收具有生物活性的蛋白却变的相当困难,需要对聚集的蛋白进行变复性,通常活性蛋白的得率比较低;是否
X-100或脱氧胆酸钠)和低浓度变性剂(2mol/L尿素或盐酸胍等)洗涤除去脂类和膜蛋白,这一步很重要,否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂,如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍,通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差,异氰盐酸胍最强;去污剂,如SDS[7],可以破坏蛋白内的疏水键,可以增溶几乎所有的蛋白,但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中;酸,如70%甲酸[9],可以破坏蛋白
肝炎病毒包膜E2蛋白相同的亲和结合力3。另外,有阴离子转运载体AE1结构域的重组蛋白被标记且用Rho1D4系统纯化后表现出与红细胞来源的AE1蛋白有相同的硫酸外排速率。4) 利用Rho1D4纯化膜蛋白图解简述步骤1:结合:将Rho1D4标记的蛋白与载有Rho1D4抗体的琼脂糖一同孵育使得目标蛋白被固定在吸附材料上。 步骤2:清洗:将杂蛋白和其他裂解液成分洗去,留下与亲和基质结合的目标蛋白。 步骤3:洗脱:过量Rho1D4肽与基质竞争性结合,释放出目标蛋白在洗脱液中收集。 表
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