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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
179
- 英文名:
M5 HiPure Origami B (DE3) pLysS大肠杆菌菌株,提供胞内蛋白二硫键形成的最优环境,减少本底表达
- 保质期:
1年
- 供应商:
江南纯
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
0.5 ml
★ 温馨提醒M5 HiPure Origami B (DE3) pLysS大肠杆菌菌株,提供胞内蛋白二硫键形成的优环境,减少本底表达
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文献和实验( DE3 )表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容,可用于 pET-32 载体,硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株,还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
2系列,thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)两条主要还原途径双突变菌株,显著提高细胞质中二硫键形成几率,促进蛋白可溶性及活性表达。(卡那霉素敏感)Rosetta-gami™ 2 则是综合上述两类菌株的优点,既补充7种稀有密码子,又能够促进二硫键的形成,帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核蛋白。(卡那霉素敏感)Origami B 是衍生自 lacZY突变的 BL21菌株,这个突变能根据IPTG的浓度精确调节表达
改进方案 建议菌株 无蛋白表达 E. coli 的密码子偏移性 补充稀有密码子的tRNA;将稀有密码子突变为普通大肠杆菌密码子 Rosetta 2 Rosetta-gami 2 Rosetta-gami B RosettaBlue 出现截短蛋白 包涵体 二硫键形成困难 降低宿主胞质的还原性;利用促进二硫键形成的各种载体标签 Origami 2
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