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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Radix sanguisorbae
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
产品名称:地榆LAMP鉴定试剂盒说明书
英文名称:Radix sanguisorbae
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
D-半胱氨酸盐酸盐一水 D-Cysteine hydrochloride monohydrate 质量规格:度大于98%,BR,一水物 ratCoicosterone,COELISA试剂盒大鼠皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
钙蛋白酶抑制剂II(进口) Calpain Inhibitor II(ALLM) 质量规格:≥95%,美国进口 小鼠静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA试剂盒 ,英文名: QSOX1 ELISA Kit
炔孕酮/妊娠素(标准品) Ethisterone 质量规格:>98%,标准品 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA检测试剂盒Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 96T/48T
炔孕酮/妊娠素 Ethisterone 质量规格:>98% 大鼠血管生成素1(ANG-1)试剂盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit
D-胱氨酸 D-Cystine 质量规格:0.98 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格:96T/48T
DL-色氨酸 DL-Tryptophan 质量规格:>98%,BR 高质化胶回收试剂盒20
DL-丝氨酸 DL-Serine 质量规格:>98%,可用于细胞培养 ELISAKithNP/RA33人异质型核糖核蛋白复合物规格:48T/96T
L-蛋氨酸;甲硫氨酸 L-Methionine 质量规格:>98%,BR 小鼠精酸酶(Arg)ELISA试剂盒 ,英文名: Arg ELISA Kit
DL-苯丙氨酸 DL-Phenylalanine 质量规格:>98,BR 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA检测试剂盒Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 96T/48T
DL-天冬酰胺,一水 DL-Asparagine monohydrate 质量规格:>99% 大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)试剂盒 Rat vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1/CD106 ELISA kit
地榆LAMP鉴定试剂盒说明书风信子素 HPLC≥98% 20mg differeiation40ligand,sCD40LELISA试剂盒兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒规格:96T/48T
蜂斗菜内酯A HPLC≥98% 20mg DMDC处理试剂盒100
佛手柑内酯 HPLC≥98% 20mg DMDC水500毫升
佛手柑素 HPLC≥98% 20mg DMEM/F12培养基1/10升(片剂)
佛司可林 HPLC≥98% 20mg DMEM培养基1/10升(片剂)
伏格列波糖 HPLC≥98% 20mg DMEM完全培养液(无抗生素)500毫升
扶桑甾醇 HPLC≥98% 10mg DMEM完全培养液500毫升
茯苓酸 HPLC≥98% 5mg DMEM细胞培养基A高糖、谷氨酰胺、同酸B高糖、谷氨酰胺C高糖、同酸D低糖、谷氨酰胺、同酸E无酚红500毫升
辅酶Q HPLC≥98% 20mg DNA标准样(100至2000碱基)50
附子灵 HPLC≥98% 20mg DNA产物0酸化处理试剂盒10
differeiation40ligand,sCD40LELISA试剂盒兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒规格:96T/48T 风信子素 HPLC≥98% 20mg
DMDC处理试剂盒100 蜂斗菜内酯A HPLC≥98% 20mg
DMDC水500毫升 佛手柑内酯 HPLC≥98% 20mg
DMEM/F12培养基1/10升(片剂) 佛手柑素 HPLC≥98% 20mg
DMEM培养基1/10升(片剂) 佛司可林 HPLC≥98% 20mg
DMEM完全培养液(无抗生素)500毫升 伏格列波糖 HPLC≥98% 20mg
DMEM完全培养液500毫升 扶桑甾醇 HPLC≥98% 10mg
DMEM细胞培养基A高糖、谷氨酰胺、同酸B高糖、谷氨酰胺C高糖、同酸D低糖、谷氨酰胺、同酸E无酚红500毫升 茯苓酸 HPLC≥98% 5mg
DNA标准样(100至2000碱基)50 辅酶Q HPLC≥98% 20mg
DNA产物0酸化处理试剂盒10 附子灵 HPLC≥98% 20mg
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
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文献和实验长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
诊断中是不需要特殊仪器的,但临床使用的成品试剂盒有赖于和国内拥有毒株的老师合作开发针对中国国情的疾病LAMP引物,在研发过程中由于涉及引物的选择,引物浓度的调整,及反应温度和时间的优化,需要用一种量化的方式去帮助研究者分析选择数据,因此我们推荐用荣研公司的专利产品LA-320C实时基因扩增仪。 3. 操作的便捷性 LAMP方法较其他基因诊断方法,其最大的优势就在于操作的简便性及对仪器设备和人员要求低。LAMP操作步骤少,只需按照说明书要求将反应液、酶、引物和模板按照规定的量加入PCR
按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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