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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Radix sophorae flavescentis
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
产品名称:苦参探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称:Radix sophorae flavescentis
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
司班80;司盘80 Span* 80 质量规格:BR 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit 96T/48T
聚乙二醇1000 PEG 1000 质量规格:分子量1000 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Rat apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
胰蛋白胨(BD) Tryptone 质量规格:BD 211705 英文名称HumanFASLELISAKit人FASL规格:96T/48T
丹磺酰氯 DNSCl, Dansyl chloride 质量规格:>98% 动物组织氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒50
N-乙基顺丁烯二 N-Ethylmaleimide 质量规格:>98%,BR ELISAKitIL-17兔白介素17规格:48T/96T
碳酸氢钾(AR) Potassium bicarbonate 质量规格:>99%,AR 小鼠纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒 ,英文名: VCL ELISA Kit
十二烷基磺酸钠(BR) Sodium dodecanesulfonate 质量规格:>98%,BR 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 96T/48T
茶碱 Theophylline 质量规格:>99%,BR 大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit
纤维素酶 Cellulase 质量规格:>2000U/mg 英文名称HumanFASELISAKit人FAS规格:96T/48T
硫酸软骨素 Chondroitin sulfate 质量规格:>95%,BR 动物组织氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50
苦参探针法PCR鉴定试剂盒磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒 ,英文名: CYCS ELISA Kit
泡蛙肽 Physalaemin 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
PKI-tide PKI-tide 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit
血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX3)ELISA试剂盒 ,英文名: COX3 ELISA Kit
Pneumadin,人 Pneumadin (human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP27B1 ELISA Kit
Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2B6 ELISA Kit
朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2E1 ELISA Kit
前肾上腺髓质素(1-20),人 Proadrenomedullin (1-20)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP3A4 ELISA Kit
前肾上腺髓质素(45-92),人 Proadrenomedullin (45-92)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员7A1(CYP7A1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP7A1 ELISA Kit
蛋白激酶C(19-31) Protein Kinase C (19-31) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞外基质0酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 ,英文名: MEPE ELISA Kit
小鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA试剂盒 ,英文名: CK 18-M65 ELISA Kit 五肽胃泌素 Pentagastrin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYFRA21-1 ELISA Kit 肽YY,人 Peptide YY, Human 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA检测试剂盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIg 96T/48T 肽YY,犬,大鼠,小鼠,猪 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒 ,英文名: CYCS ELISA Kit 磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-C 96T/48T 泡蛙肽 Physalaemin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit PKI-tide PKI-tide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX3)ELISA试剂盒 ,英文名: COX3 ELISA Kit 血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP27B1 ELISA Kit Pneumadin,人 Pneumadin (human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2B6 ELISA Kit Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2E1 ELISA Kit 朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 质量规格:>95%,BR
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
英文名称:Radix sophorae flavescentis
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
司班80;司盘80 Span* 80 质量规格:BR 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit 96T/48T
聚乙二醇1000 PEG 1000 质量规格:分子量1000 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Rat apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
胰蛋白胨(BD) Tryptone 质量规格:BD 211705 英文名称HumanFASLELISAKit人FASL规格:96T/48T
丹磺酰氯 DNSCl, Dansyl chloride 质量规格:>98% 动物组织氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒50
N-乙基顺丁烯二 N-Ethylmaleimide 质量规格:>98%,BR ELISAKitIL-17兔白介素17规格:48T/96T
碳酸氢钾(AR) Potassium bicarbonate 质量规格:>99%,AR 小鼠纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒 ,英文名: VCL ELISA Kit
十二烷基磺酸钠(BR) Sodium dodecanesulfonate 质量规格:>98%,BR 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 96T/48T
茶碱 Theophylline 质量规格:>99%,BR 大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit
纤维素酶 Cellulase 质量规格:>2000U/mg 英文名称HumanFASELISAKit人FAS规格:96T/48T
硫酸软骨素 Chondroitin sulfate 质量规格:>95%,BR 动物组织氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50
苦参探针法PCR鉴定试剂盒磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒 ,英文名: CYCS ELISA Kit
泡蛙肽 Physalaemin 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
PKI-tide PKI-tide 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit
血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX3)ELISA试剂盒 ,英文名: COX3 ELISA Kit
Pneumadin,人 Pneumadin (human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP27B1 ELISA Kit
Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2B6 ELISA Kit
朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2E1 ELISA Kit
前肾上腺髓质素(1-20),人 Proadrenomedullin (1-20)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP3A4 ELISA Kit
前肾上腺髓质素(45-92),人 Proadrenomedullin (45-92)(human) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞色素P450家族成员7A1(CYP7A1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP7A1 ELISA Kit
蛋白激酶C(19-31) Protein Kinase C (19-31) 质量规格:>95%,BR 小鼠细胞外基质0酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 ,英文名: MEPE ELISA Kit
小鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA试剂盒 ,英文名: CK 18-M65 ELISA Kit 五肽胃泌素 Pentagastrin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYFRA21-1 ELISA Kit 肽YY,人 Peptide YY, Human 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA检测试剂盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIg 96T/48T 肽YY,犬,大鼠,小鼠,猪 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒 ,英文名: CYCS ELISA Kit 磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-C 96T/48T 泡蛙肽 Physalaemin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit PKI-tide PKI-tide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX3)ELISA试剂盒 ,英文名: COX3 ELISA Kit 血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP27B1 ELISA Kit Pneumadin,人 Pneumadin (human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2B6 ELISA Kit Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2E1 ELISA Kit 朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 质量规格:>95%,BR
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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