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2-8℃
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2年
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无
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100
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 规格:
5000次
- 产品简介:
1. 灵敏度更高。
2. 线性范围在 7.8~500 μg/mL,尤其适用于低浓度的样品。
3. 对大多数离子型和非离子型去污剂不敏感,但对 Cu 的还原剂和螯合剂敏感。
4. 比 Lowry 法更加简单快捷。
5. 试剂稳定,室温可以放置两年,工作液 1 天内有效。
6. 终产物稳定,检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7. 最短可以检测双肽,所以适合于分子量较小的蛋白质,而 Bradford 法需要一定大小的蛋白质。 - 标准品以及工作液的制备:
A. BSA蛋白标准品稀释液的制备:
表1. 将标准品储存液稀释至7.8~500 μg/mL,推荐使用去离子水或0.9% NaCl。
管号 稀释液体积 BSA标准品体积 终浓度
A 250ul 250 μl (5 mg/ml) 500μg/ml
B 250ul 250ul(从A管取) 250μg/ml
C 250ul 250ul(从B管取) 125μg/ml
D 250ul 250ul(从C管取) 62.5μg/ml
E 250ul 250ul(从D管取) 31.25μg/ml
F 250ul 250ul(从E管取) 15.6μg/ml
G 250ul 250ul(从F管取) 7.8μg/ml
H 250ul 0 0μg/ml(空白孔)
B. 微量BCA工作液的制备:
根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B(50:1)配制适量 BCA 工作液,充
分混匀。
使用方法
1. 将 25ul 的标准品和合适浓度范围的样本(比如 5ul 样品+20ul 稀释液)分别添加于 96 孔板的微孔中。
2. 各孔加入 200ul BCA 工作液,充分混匀。
3. 盖上 96 孔板盖,37℃孵育 45 分钟或者 60℃孵育 30 分钟(如果浓度较低,可适当提高孵育温度或延
长孵育时间)。
4. 冷却到室温,用酶标仪测定 A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度.
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文献和实验大鼠尿微量白蛋白 (ALB) 酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用 ! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠尿液或其它相关生物液体中 ALB 含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗 ALB 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 ALB 抗体、 HRP 标记的 亲和素 ,经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色
法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
、稳定性等性能会优于科研试剂盒。 Q2:试剂盒能否分次使用?没有用完的试剂组分如何存放? A2:试剂盒可以分次使用。我们的酶标板条是可拆卸的,您可以根据实验需求,确定每次实验所需的酶标板条数量及各试剂组分含量。 溶解后的标准品,建议以最高浓度/母液,分装保存于 -20℃ 条件下,避免反复冻融,半个月内使用有效。 生物素化抗体工作液及 HRP 酶结合物工作液需现配现用。未用完的浓缩液及其他组分,需要按照说明书要求,分别及时地保存于 2~8℃/-20℃ 条件下,一般可存放 6 个月。 样本 Q1
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