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加尾法miRNA RT-qPCR试剂盒:FQTM miRNA

Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit(T427)
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  • 广州
  • T427
  • 2026年01月03日
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    • 保质期

      1年

    • 英文名

      FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit

    • 库存

      充足

    • 供应商

      广州英赞生物科技有限公司


    加尾法miRNA定量检测试剂盒

    产品概述
    MicroRNA (miRNA)是一类长度为19-23 nt的内源性非编码单链小分子RNA,是一种重要的基因表达调控因子。本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾Poly(A),再使用Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,生成miRNA对应的cDNA第一链,最后采用miRNA的特异性正向引物和通用反向引物进行特异性的miRNA qPCR检测。该试剂盒能够从单一样品中快速、准确地定量检测miRNA,具有高通量,高灵敏度,高特异性等优点。

    产品内容
    组分 T427S/
    20polyA+20RT+200qPCR
    T427L/ 
    60polyA+60RT+600qPCR
    Poly(A) Polymerase 20 μL 60 μL
    5× Poly(A) Polymerase Buffer 40 μL 120 μL
    PreScript II Enzyme Mix 40 μL 120 μL
    5× PreScript II RT Buffer 80 μL 240 μL
    Universal RTase Primer 45 μL 130 μL
    2× FQ miRNA SYBR qPCR ProMix 1 mL× 2 1 mL× 6
    mRQ Universal Reverse Primer(透明盖) 105 μL 310 μL

     

    产品优势
    高灵敏度:具有宽广的动态变化范围,无需担心样品 量少或miRNA 表达量低而无法精确检测
    高特异性:预采用具有茎环结构的通用逆转录引物和高特异的通用qPCR引物,确保检测的特异性 
    高通量:一次逆转录反应,可检测多个miRNA 

    实验案例
    1.  高灵敏度

     
    将has-mir-144-3P miRNA标准品进行10倍梯度稀释,从1 μM 至10 pM共6个梯度,使用FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit对其进行定量检测 ,并以从A公司购买的同类产品作为对照。结果表明相对于同类产品FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 具有更低的检测限及更高的灵敏度。

    2.  高特异性及高通量
     
    以1 μg X293 Total RNA 为模板,进行加多聚A尾再进行逆转录,将逆转录反应液稀释5倍作为模板,同时检测12种miRNA,每孔添加5 μL。结果表明FQTM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit 可同时检测多种miRNA,且均具有较好的检测特异性,结果可信度高。

    应用范围
    miRNA定量检测、miRNA表达分析

     

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    • miRNA检测

      1. RNA提取 在以上两种RT引物中,Ologod(T)特异引物所需要的RNA尽量是用特殊试剂盒提取的小RNA,而茎环状结构RT引物需要RNA正常提取就好。 另外由于所需样本不同RNA提取方法也不完全相同,普通组织样本和细胞可以研磨用Trizol+氯仿抽提;血液和植物样本需要前期处理后再用Trizol+氯仿或用专门的Kit抽提。 2. 反转录 确认用Oligod(T)特异RT引物时,RNA需要进行3'Poly(A)加尾处理。 反转录的酶没有特殊要求,操作请按照各自反转录酶的说明书

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