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罗丹明标记鬼笔环肽
MCE 国际站:罗丹明标记鬼笔环肽
罗丹明标记鬼笔环肽是一种高亲和的 F-肌动蛋白探针,与橙色染料四甲基罗丹明 (TRITC) 偶联。
Description & Advantages:
Phalloidin is a mushroom-derived toxin which can be used to specifically label F-actins (actin filaments) of the cytoskeleton. It binds to all variants of actin filaments in many different species of animals and plants. Typically, Phalloidin is used conjugated to a fluorescent dye. Phalloidin binds F-actins with high selectivity while Rhodamine provides stable and bright orange fluorescence.
Rhodamine Phalloidin is 1000× stock solution in DMSO which is convenient for labeling, identifying and quantitating F-actins in formaldehyde-fixed and permeabilized tissue sections, cell cultures or cell-free experiments.
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文献和实验四乙基罗丹明标记抗体: 1. 称取1g RB200及2g PCL5放在乳钵中于通风橱中研磨5min; 2. 加入10ml无水丙酮,不断搅拌,5min后过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,于4℃干燥保存; 3. 量取一定量的浓度为20mg/ml的抗体,按1:1:1的比例分别加入等体积的生理盐水和0.5mol/L pH9.0的碳酸盐缓冲液来稀释抗体; 4. 再加入0.1ml的RB200溶液,边滴加边搅拌,在0—4℃中结合12—18h; 5. 用生理盐水透析5—
1. 培养细胞到对数生长期(约 107 细胞 /ml )。 2. 直接取 0.1ml 甲醛加到含有 1ml 培养物的离心管中固定细胞(甲醛浓度为 3.7 %;标准母液是 37 %)。 3. 在甲醛中培养细胞 30 分钟或稍长时间。 4. 用 PBS 洗两次,离心 5 分钟收集细胞。 5. 用 50 μ l 的 PBS 悬浮细胞,加 5 个单位的罗丹明或荧光素连接的鬼笔环肽。 6. 用 PBS 洗 3 次,重新悬浮在小体
的鬼笔环肽。 6. 用 PBS 洗 3 次,重新悬浮在小体积的封固剂中。 7. 用罗丹明或荧光素滤片观察。
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