TPX量筒（500ml）

碱裂解法大量提取质粒（500mL菌液）

相关专题 成功走出第一步：DNA提取 碱裂解法 大量提取质粒(500mL菌液) 1、取培养至对数生长后期(一般培养12～16小时)的含待提质粒的细菌 培养液于离心杯中，配平，4℃下4000rpm离心15min，弃上清，然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。 2、向盛有细菌 沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ，重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ，用干净的玻璃棒搅拌均匀后，再加剩下的部分)。

RNA甲醛变性胶电泳

，在通风橱中，加入2ml DEPC到2升去离子水中，终浓度为0.1%的DEPC。迅速盖上盖子，混匀，然后放在摇床中中速摇荡至少4hr，再高压灭菌。灭菌时将瓶盖松开，15磅灭菌20min。2、10 × FA Buffer（formaldehyde agarose buffer：200 mM的MOPs，50 mM的NaAc，10 mM的EDTA）：配制500ml，称取3.4g NaAC•3H2O放入1000ml烧杯中，加入400ml DEPC 处理过的去离子水，加入搅拌子，放在磁力搅拌器上溶解。然后加

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该