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- 2025年12月31日
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- 英文名：
PNGase F（肽N-糖苷酶）
- 库存：
203
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
15000U/75000U
| 规格： | 15000U | 产品价格： | ￥1375.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 75000U | 产品价格： | ￥6187.0 |
肽N-糖苷酶 F （Peptide-N4-(N-acetyl-β-D-glucosaminyl) asparigineamidase, PNGase F）是一种酰胺水解酶，主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌，能够在温和的条件下从糖肽、糖蛋白上面完整切下N-连接的寡糖链（N-糖苷），将寡糖链和蛋白部分分开。该酶具有广泛的底物专一性，对所有类型的N-寡糖链都有作用。这些特性使其在糖链结构分析、糖链在生物体内的作用和糖链对糖蛋白的作用的研究中起到了重要的作用。
PNGase F可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖，及杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键，同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。
表达宿主：大肠杆菌
酶切位点：PNGase F几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有N-连接糖（x = H 或寡糖）
分子量：36kDa
纯度：90% （SDS-PAGE）
酶活性定义：1单位（U）指在10μl的反应体系中，37℃条件下1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量。
比活性：1,800,000 U/mg
酶切反应条件：将1×糖蛋白于糖蛋白变性缓冲液（含0.5%SDS，40mM DTT）中100℃温度下煮沸10分钟使其变性，然后加入1%NP-40的1×反应缓冲液（50mM磷酸钠 pH7.5储存于25℃）以及适量的PNGase F 在37℃温度下温育进行酶切反应
储存条件：-20℃
缓冲液：50 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl pH 8.0, 5 mM EDTA
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文献和实验Deglycosylation of Glycoproteins Using Endoglycosidases
Enzymes, Substrates and Buffers: PNGase F1 Didansyl-fetuin glycopeptide (L-A-N(CHO)-AeC-S, triantennary), 100 mM Hepes, pH 8.6 Endo F1 Dansyl-N-(GlcNAc)2 (Man
. 然而, 当肼被用于反应时, N- 乙酰基在反应中被切割掉于是需要额外的乙酰化步骤. 如果在一些胺的第一个位置没有胺上的乙酰基那就没有办法分离. 因为肽结构在肼反应条件下被分解, 还有蛋白质分析的问题. 在酶方法中, 用肽N-糖苷酶F(PNGase F)分离N-连接的糖是可能的而且有用的. 可是, 能与O-连接的糖广泛反应的酶还未被发现. 当糖被分离的时候, 为便于分析, 通常还原末端被萤光或放射性分子标记. 在元素分析之前, 首先用硅胶色谱测体积, 用阴离子交换树脂测离子数. 然后, 用HCl
. The secreted recombinant GST-F2 /F1 protein was further analysed using glycosidases. Our results showed that the GST-F2 /F1 protein were sensitive to peptide: N -glycosidase F (PNGase F) treatment, but not to Endoglycosidase H (EndoH) treatment. This indicates
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