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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 英文名:
重组腺病毒载体快速检测卡
- 库存:
168
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100个/包/10个/包
| 规格: | 100个/包 | 产品价格: | ¥5500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10个/包 | 产品价格: | ¥687.0 |
原理
本产品是基于胶体金侧向层析技术的腺病毒快速检测卡,可以用于腺病毒载体包装和腺病毒滴度的快速评估。
用途
1. 5型重组腺病毒包装或扩增时的病毒滴度快速评估:重组腺病毒载体效价评估方法有基于细胞病变的TCID50测定、核酸杂交、实时荧光定量PCR、SDS-PAGE电泳等。这些方法均耗时耗力,并且成本高昂。与上述方法相比,腺病毒快速检测卡使用简便,检测时间短,可以随时对转染效果进行评估。如在更换培养基时,吸取样品滴加到检测卡上,10~15min后即可判读结果。因此,使用该快速检测卡,可以快速评估转染效果,减少不必要的时间和试剂浪费。
2. 用于粪便标本中腺病毒的快速检测:腺病毒是引起儿童腹泻的主要病原体之一。腺病毒感染导致的腹泻中,约70%为腺病毒40、41型,此外,3、7、11型等其他腺病毒也能够引起腹泻。使用本检测卡可以快速鉴定粪便标本中是否存在上述亚型的腺病毒(其他亚型未测试)。
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文献和实验(一) 构建重组腺病毒载体的目的 1. 增加外源基因的装载容量 我们知道,腺病毒有一定的包装容积限制,大约在75~105%,即28~40kb左右,若超出此范围则或是不能包装或是发生分子重排。以5型腺病毒基因组36kb计算,在不对腺病毒基因组作任何改变的情况下,腺病毒载体最多可以转运2.8kb左右的外源基因,这对于许多基因治疗方案来说是远远不够的。为了进一步地扩大腺病毒载体的应用范畴,有必要缺失其基因组中的某些反式作用元件以增大其装载容积。 2. 降低免疫原性 如前
。两种DNA分子共转染入可以表达腺病毒E1区蛋白的细胞(如293、911以及PERC6等),并发生同源重组,即可得到预期的复制缺陷型重组腺病毒。其缺点是:容易受到亲代病毒的污染,必须经过2-3次的病毒空斑纯化,并通过多次的嗜斑形成方法鉴定重组病毒。另外,重组效率低下,重组腺病毒通常需要花费两周左右的时间。虽说如此,本方法是构建腺病毒载体的经典方法,目前应用于临床的腺病毒载体都是以这种方法构建的。因此,若是构建重组腺病毒的最终目标是成功地应用于临床还是以这种方法为佳。而且难度是相对的,对于一个在构建
,从而将目的基因靶向性地导入肿瘤细胞。Khare等将抗人癌胚抗原(CEA)单链抗体编码基因与env基因重组,使反转录病毒将“自杀基因”――一氧化氮合成酶(NOS)靶向导人CEA阳性的肿瘤细胞,并通过过度合成NOS杀死肿瘤细胞。 靶向转移目的基因策略的工作原理 另一个例子是腺病毒。腺病毒载体在感染靶细胞时,首先依靠通过病毒衣壳(capsid)上的纤维蛋白(nber)头部的knob结构域识别并结合靶细胞表面的“柯萨奇病毒和腺病毒受体”(CAR),然后通过衣壳的五邻体
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