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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
TMB可溶型底物
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
500ml/100ml
| 规格: | 500ml | 产品价格: | ¥748.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥220.0 |
TMB可溶型底物
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文献和实验气泡。加样时间宜控制在10分钟内。 洗涤:甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350 μL,浸泡1-2分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤3次。提示:此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。 HRP酶结合物:每孔加酶结合物工作液100 μL,混匀,加上覆膜,37℃孵育30分钟。 洗涤:弃去孔内液体,洗板5次,方法同步骤2。 底物:每孔加底物溶液(TMB)90 μL,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短
体,洗板 5 次,方法同步骤 3。 底物:每孔加底物溶液(TMB) 90 μL,混匀,加上覆膜,37℃ 避光孵育 15 分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短或延长孵育时间,但不可超过 30 分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止。 终止:每孔加终止液 50 μL,终止反应。提示:终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。 读值:立即用酶标仪在 450 nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪预热,设置好检测程序。 实验完毕后,将未用完的试剂按规定
本底值增高。OPD 底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD 产物用硫酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。 TMB 受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应边观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB 经 HRP 作用后,约 40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至 2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24
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