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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Western Blot膜再生液
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
2~8ºC
- 规格:
100ml
产品描述
本试剂能够去除印迹膜上的一抗和二抗,可以在同一个膜上反复多次进行蛋白印记实 验。试剂的作用比较缓和,一般不改变抗原的结构特性。
使用方法
1. 印迹膜完全进入抗体去除液中。
2. 室温孵育5~10分钟,在摇床上剧烈摇动。
3. 弃去抗体去除液。
4. 加入蒸馏水或去离子水,在摇床上剧烈摇动。
5. 重复步骤4五次。
6. 检测抗体是否完全去除(见注意事项)。
7. 如果抗体未完全去除,可以再次与抗体去除液孵育5~10分钟。
8. 抗体去除成功后,用封闭液封闭膜,进行新的实验。
Western Blot膜再生液 注意事项
1. 优化佳反应时间有助于得到zui的结果。
2. 如果做完检测的印迹膜不能马上做去除抗体的实验,可以浸入 TBS 或 PBS,并4℃保存。
3. 一般来说,高亲合力抗体或大量的检测蛋白可能需要与抗体去除液孵育更长的时间。
4. 检测是否完全去除 HRP 标记物的方法:步骤5完成后,可加新鲜的化学发光液在胶片上 曝光5分钟,如果没有检测到信号,说明 HRP 已经完全从抗原或一抗上去除。
5. 检测是否完全去除一抗:步骤5完成后,将膜与 HRP 标记的二抗孵育,用洗涤液洗涤后, 可加新鲜的化学发光液在胶片上曝光5分钟,如果没有检测到信号,说明一抗已经从抗 原上去除。
6. 印迹膜可以反复去除结合抗体多达5次以上,如果抗原稳定性差,每次检测信号会逐渐 减弱。
储存:常温运输(勿超过30℃), 2~8℃储存。 有效期2年。
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文献和实验llh刘丽华 请教高手我最近做western blot,结果总是不理想,目的条带总是很淡,上样量已经是60ug了,封闭用的是5%脱脂奶粉,我还应该怎么改进哦?下面是我的结果,采用的是ECL化学发光,凝胶成像系统拍照,下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧! Mostino 转膜应充分,并提高第一抗体的使用量! 成其瑞 用好点的抗体 volano
anlise 刚做的western,跑分离胶时发现mark的条带被拖长了,原来的线性条带变成了长方形。 考虑哪些方面的原因呢? selleckchemcials 1. 可能是电流太强了, 可以考虑把电压调低一点~ 2. 分离胶浓度有点低,可以考虑把换成高浓度的胶~ 做实验的时候,为了得到漂亮的图,一定不要介意多花时间~我有的时候为了让条带好看,170KD的蛋白都用12%的胶,跑上3小时呢~
zhuhuachao 请问各位战友, western-blot法测得的结果是你所要检测蛋白的总蛋白还是只包括游离的蛋白?或者说该目标蛋白与其他蛋白结合以后,western-blot法结果上是否有所反应? amygdala 一般来说,western blot检测到的是包括游离态和聚合态的总蛋白,目标蛋白与其他蛋白结合的情况下也能检测出来。能否检测取决于抗体的识别位点是否存在,通常情况下目标蛋白的抗体识别位点不会受其形成复合物影响






