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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 英文名:
腹水专用佐剂
- 库存:
18
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
500ml
将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞,建议每只注射80万-100万个。腹水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍,且单抗腹水效价不变。
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文献和实验/C小鼠。 2.免疫方案 选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功,获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫,免疫方案应根据抗原的特性不同而定。 (1)可溶性抗原免疫原性较弱,一般要加佐剂,半抗原应先制备免疫原,再加佐剂。常用佐剂:福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂。 初次免疫 抗原1~50μg加福氏完全佐剂皮下多点注射或脾内注射(一般0.8~1ml,0.2ml/点) ↓3周后 第二次免疫 剂量同上,加福氏不完全佐剂
量。 杂交瘤细胞融合后,要进行筛选后才能使用。杂交瘤细胞分为两次:一、筛选出杂交瘤细胞;二、在初选的杂交瘤细胞中筛选出能产生特异性抗体的杂家瘤细胞,这两次筛选的方法和原理各不相同。3. 腹水制备及单抗纯化 腹水的制备过程比较简单: 第一步,提前一周用弗氏不完全佐剂0.5ml注射小鼠腹腔; 第二步,注射佐剂后一周将生长旺盛的杂交瘤细胞离心弃去培养基,用PBS或者不完全培养基重悬后注射小鼠腹腔,一般7-10天左右就可以看到小鼠腹腔明显肿大,此时可以处死小鼠采集腹水
单克隆抗体制备主要步骤包括:动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选与单抗检测、杂交瘤细胞的克隆化、单抗的鉴定及制备等。 1 动物免疫 根据抗原的特性选择合适的免疫方案,对于可溶性抗原免疫原性弱,一般要加佐剂。常用佐剂为福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂。要求抗原和佐剂等体积混合在一起,研磨成油包水的乳糜状。 (1)初次免疫,Ag50ug/只,加福氏完全佐剂皮下多点注射,一般 1.5 ml, 间隔 3 周。 (2)第二次免疫,剂量途径同上,加福氏不完全佐剂
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