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- 一基
- 上海
- YJKG5411
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
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一基
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现货状态
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文献和实验科研君们，当埋头实验几月找到了目标基因片段，电泳时条带却突然消失了；千辛万苦分离纯化的物质，色谱图中却意外出现杂质峰，苦苦查询，可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上，科研君的心还能淡定吗？ 吸头的问题在哪里，如何保证纯净无污染的吸头？需要考虑以下几方面因素： 一、 吸头材质 吸头市场上，原材料基本都是聚丙烯塑料（低吸附，化学惰性高，使用温度范围广，无色透明）。也许大家不知道的是，同样是聚丙烯，品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯，而低廉的吸头则很多
min,(30min 后沉淀变成一个白色的小团块)6、12000RPM，4℃，15min 离心，此时组蛋白已经溶解在上清中，将上清转移到新的 EP 管中，加入 20ul 的 1M Tris ph=8.0 中和酸性（5 倍体积的 HCL 加 1 倍体积的 1M Tris PH=8.0, 如 100ul 的上清中，可加入 20ul 的 1M Tris。若中和不充分，则在下一步加入 SDS 的时候溶液会呈现黄色，可适量补加 1M Tris PH=8.0，只到溶液恢复蓝色）。7、可用考马斯法测
体积的 1M Tris PH=8.0, 如 100ul 的上清中，可加入 20ul 的 1M Tris。若中和不充分，则在下一步加入 SDS 的时候溶液会呈现黄色，可适量补加 1M Tris PH=8.0，只到溶液恢复蓝色）。7、可用考马斯法测蛋白浓度8、用 SDS 煮蛋白，100℃，10min.。接下来可进行 Western blot 实验。9、跑胶时，上样量为 5ug 时比较适宜。可以根据自己的具体实验进行调整。然后你就可以有这样的美美的结果啦！
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