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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Rnase Inhibitor RNA酶抑制剂
- 保质期:
切勿冻存,有效期24个月
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
长时间储存于4℃
- 规格:
4×2000 units
产品介绍:
本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,对RNase表现高度的非竞争性抑制,本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类,无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
■产品组成:
| 产品组成 | 包装规格 | |
| ZY1071 | ZY1075 | |
| RNasin(40U/μl) | 50 μl | 4×50 μl |
■保存:
-20 ℃长期保存,保质期2年。
■用途:
(1)cDNA合成反应;
(2)多核糖体的分离;
(3)体外翻译;
(4)SP6或T7 RNA聚合酶的体外转录;
(5)体外无细胞系统转录。
■活性定义:
抑制5ngRNaseA活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
■纯度:
(1)300U的RNasin和1μg的λ DNA-Hind III在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化;
(2)300U的RNasin和1μg的pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化;
(3)100U的RNasin和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
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文献和实验,如果用测序电泳装置,电压应达2000v以上,功率设定为100w,温度设为50℃。待胶板温度达50℃时,暂停电泳,准备加样。 ③ 加样 将已溶解在加样缓冲液中的样品80℃加热2min,立即加样到胶孔中,电泳1-2hr。(电泳条件同预电泳)。 ④ 电泳结束后,打开胶板,用滤纸取下胶,覆上一层保鲜膜,放置于暗盒中,暗室红光下,压上一张X片,盖上暗盒,-70℃曝光1-3天。暴光结束后,将X光片显影、定影、水洗、晾干。 三、注意事项 1.本实验大部分为RNA操作,注意RNA酶的污染。 2.
:(50 ml) 40%丙烯酰胺-亚甲双丙烯酰胺(19:1) 6.25 ml 5×TBE 10 ml 尿素 24 g 加H2O至50 ml 溶解后加入25%过硫酸胺50 μl,TEMED 50 μl,混匀,注入电泳槽中,插入梳,待胶凝固。 (2)预电泳 以1×TBE为上下槽电泳缓冲液,加上电压后进行预电泳,如果用测序电泳装置,电压应达2000 v以上,功率设定为100 w,温度设为50℃。待胶板温度达50℃时,暂停电泳,准备加样。 (3)加样 将已溶解在加样缓冲
为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注意事项,只是在遇到问题时可能采用其中的一种或几种方法加以解决。一、实验程序如不谨慎操作,外源性RNA酶可以通过下述途径污染RNA制品:(一)玻璃制品、塑料制品和电泳槽灭菌的一次性使用的塑料制品基本
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