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- 泽叶生物
- ZY1151N
- 国产/进口
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
细菌基因组DNA快速提取试剂盒
- 保质期：
-20℃保存2年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
盒
细菌基因组DNA快速提取试剂盒
● 裂解液MS中含变性剂，请不要直接接触皮肤。
● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，即含75%乙醇。
产品说明
本产品用于细菌基因组DNA的小量提取。其纯化原理是利用细胞裂解液裂解细胞释放基因组DNA，由硅胶膜柱可逆吸附基因组DNA，经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质等杂质后，用纯化液洗脱获得基因组DNA。本产品可从0.5-2 ml对数生长期的菌液（不超过106–108 个）中提取到3-20μg 超纯基因组DNA（OD260/280 = 1.7-1.9），此基因组DNA可直接用于酶切、PCR等后续实验。
质量控制
纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷贝基因的PCR扩增鉴定。
保存条件
蛋白酶K室温运输，于-20℃保存，避免反复冻融。
其余试剂置于室温（15-25℃）干燥条件下保存1年。
如果消化缓冲液DS和MS中有沉淀，可在55℃加热溶解，待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA的纯化效率。
注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
● 漂洗液PE第一次使用前请按瓶上标签加入3倍体积的无水乙醇，即15 ml漂洗液PE加入45 ml无水乙醇，30 ml漂洗液PE加入90 ml无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 消化缓冲液DS和裂解液MS室温保存可能会有沉淀产生，在55℃加热溶解，待恢复至室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA纯化效率。
● 应尽量使用新鲜的菌体，确保提取的基因组DNA不被降解。
● 在操作步骤4中，菌体应充分悬浮，不要残留菌块，避免影响溶菌效果。
● 在操作步骤5中，加入无水乙醇后，可能会出现絮状沉淀，应将离心管内的溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中，确保基因组DNA的得率。
● 基因组DNA需长期保存时，建议使用纯化液TE。用无菌的离心管分装后保存于-20℃或-80℃。
● 所有离心步骤均为室温下进行。
● 请严格按照操作步骤操作。
操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
1 取0.5-2 ml处于对数生长期菌液，置于1.5 ml离心管中。12,000 rpm离心1min，弃上清。
2 向收集到的菌体沉淀中加入200 μl 缓冲液DS，用涡旋振荡器剧烈振荡直至菌体彻底悬浮。
● 对于较难破壁的革兰氏阳性菌，需加入溶菌酶消化细胞壁后，再进行基因组DNA的提取。具体方 法为：向步骤1收集到的菌体中，加入108 μl消化缓冲液DS和72 μl的50 mg/ml的溶菌酶，振荡混匀。37℃处理30min以上。
● 如需要去除RNA，加完消化缓冲液DS或溶菌酶后，加入4 μl RNase A（100 mg/ml，N9042）溶液，振荡混匀，室温放置5min。
3 加入20 μl蛋白酶K溶液，55℃水浴或金属浴30min。
4 加入220 μl裂解液MS，涡旋振荡混匀，直至形成均一的悬浮液，65℃温浴10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠，室温放置5min使溶液冷却。
● 加入裂解液MS时可能会产生白色沉淀，一般65℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细菌细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA 不纯。
● 如菌体超过1.5 ml，可适当延长温浴时间。
5 加入220 μl无水乙醇，上下颠倒混匀，此时可能出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。将溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 若溶液体积大于纯化柱容积（700 μl），可分两次离心。
● 此时基因组DNA被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
● 如柱子堵塞表明菌体过量。若发生此情况，减少菌量，或适当延长离心时间，直至洗脱液顺利离心至离心管为止。
6 加入500 μl去蛋白液PS，12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的蛋白、脂质等杂质，以获得高质量基因组DNA。
7 加入500μl漂洗液PE，12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，即含75%乙醇。
8 加入500 μl漂洗液PE，12,000 rpm离心1min，弃滤液，12,000 rpm离心3min，以彻底去除纯化柱中残留的液体。
● 此步骤的作用是去除残留乙醇，避免影响后续的酶促反应（PCR或酶切）。同时利于基因组DNA充分溶解。
9 将纯化柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱中央处，悬空滴加30-100 μl洗脱液TE。室温放置2min。
10 12,000 rpm离心2min，管底即为高纯度基因组DNA。-20℃保存。
● 洗脱液TE可用去离子水代替，但其pH需为8.0-8.5。
● 对洗脱液TE 65℃预热，会提高基因组DNA的产量。
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文献和实验♦ 适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍：独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
粪便基因组DNA快速提取方法，无抑制物，可直接做PCR。采用硅胶膜技术从新鲜或冷冻人类粪便或其他样品类型（混有高浓度的PCR抑制剂）中抽提多至30μg 的基因组、细菌、病毒和寄生物DNA。独特的吸附树脂配合经优化的缓冲液可去除PCR抑制剂。方便的Aidlab 离心柱纯化过程只需40分钟，用于从粪便中纯化最多30μg 基因组、细菌、病毒和寄生虫DNA；快速纯化高品质，即用型DNA；无有机提取或乙醇沉淀；持续的高产量；彻底去除污染物和下游反应抑制物。纯化的DNA长度可达50 kb
适合从动物细胞、动物组织或酵母菌中同步纯化总RNA 和基因组DNA纯化的总RNA ，适合用于Northern Blot、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、S1 核酸酶作图、RNase 保护测定、制备mRNA 和构建cDNA 文库等各种RNA 分子生物学实验。纯化的基因组DNA 适用于PCR、Southern Blot、RAPD、AFLP、RFLP 等分子生物学实验。一、试剂盒组成、贮存、稳定性以每次从1×107 动物细胞、100mg 动物组织或5×107 酵母菌中
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