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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 英文名:
Corynebacterium renale
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
英文名称:Corynebacterium renale
规格:50T
编号:HE80830-R
分类:探针法荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒,其特征在于,由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成,其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶,上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列为:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型荧光探针为:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
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d-Tetrandrine
Hanfangchin B(Fangchinoline)
Wogonoside
Wogonin
2,3,5,4'-tetera-hydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside
表皮膜蛋白1抗体
抗子宫内膜抗体
内皮抑素/内皮他抗体
上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗体
大肠埃希杆菌O抗体
牛肾盂肾炎棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒范围100g25gD-201高等级大孔强碱Ⅰ型阴离子交换树脂Protein Kinase B AlphaBR100gPRL
500g5gD-201高等级大孔强碱Ⅰ型阴离子交换树脂Ring Finger Protein 5BR500gCH
100g5g大孔吸附树脂D101Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7ABR100gCR
25g1g大孔吸附树脂D101Gremlin-2BR25gTG
5g5gAmberlite XAD4离子交换大孔吸附树脂bradykininBR5gT
100g1gAmberlite XAD4离子交换大孔吸附树脂NLR family CARD domain-containing protein 4BR100gGSH-Px
250g5gAmberlite XAD4离子交换大孔吸附树脂soluble amyloid precursor protein βBR250gCAT
100g1gAmberlite XAD761离子交换大孔吸附树脂complex ⅤBR,97%100gcAMP
25g1gAmberlite XAD7HP离子交换大孔吸附树脂EzrinBR,97%25gLH
500g25gAmberlite XAD7HP离子交换大孔吸附树脂Melanoma Marker ABR,97%500gACV-A
内标对荧光定量PCR的影响:
1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,牛肾盂肾炎棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒范围无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2.内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但仍然只是一种半定量的方法。
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文献和实验上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同,定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化,得到的结果是百分比;绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同,荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为精确;荧
已经涉及到生命科学研究的各个领域,比如基因的差异表达分析,SNP检测,等位基因的检测,药物开发,临床诊断,转基因研究等。在Real-time qPCR技术的发展过程中,定量PCR仪的发展起了至关重要的作用。1995年,美国PE公司(已经并入Invitrogen公司)成功研制了Taqman技术,1996年推出了首台荧光定量PCR检测系统,通过检测每个循环的荧光强度,通过Ct值进行数据分析。从而荧光定量PCR获得广泛应用。现在的定量PCR仪有ABI7000、7300、7500,7700、7900HT
40、EF-1α及UbC和MHCI等,CMV比SV40[22]和UbC[23]等更为有效,其中内含子A更能提高CMVI/E的表达水平[22],CMV现已被广泛使用在商品化载体上,这对商业开发DNA疫苗来说是十分有帮助的。另外,一些抗原基因本身来源的启动子也可用来构建DNA疫苗,但对于想同时表达多个抗原基因的质粒而言,此种启动子的效果不明显;常用的转录终止子及终止信号包括牛生长激素(BGH)、SV40及人β-珠蛋白。此外,在构建DNA疫苗时,可利用非甲基化的细菌DNA-CpG寡脱氧核苷酸来优化整个质粒
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