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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。产品仅供科研使用
产品名称:大肠弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格:Campylobacter coli
分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
PCR实验外包服务:
PCR起源:荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点:1、封闭反应,无需PCR后处理。2、特异性强,灵敏度高。3、采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确。4、定量范围宽,可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全,缩短时间,提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)质量规格:100μg/ml,u=2%Imazalil solution 英文名称RatFXELISAKit大鼠凝血因子X(FX)规格:96T/48T 犬转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA 试剂盒 48T/96T 试剂盒 组装/原装
三氧化二铬(>99%,BR)质量规格:>99%,BRChromium (III) oxide 活体细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒20/400 山羊球蛋白A(IgA)试剂盒 Goat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit
四氧化三钴(>99%,BR)质量规格:>99%,BRCobalt (II, III ) oxide ELISAKitPL/Fbn人纤溶酶/纤维蛋白溶酶规格:48T/96T 内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒 ,英文名: GC ELISA Kit
乙酸钴四水(>99.5%,BR)质量规格:>99.5%,BRCobaltous acetate, tetrahydrate 小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA试剂盒 ,英文名: EFNB2 ELISA Kit rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
犬类胰蛋白酶试剂盒 Canine yptase ELISA Kit 65604-80-0麦冬皂苷D’规格 Ophiopogonin D’
英文名称HumanAILR2(h)ELISAKIT人血小板生成素(TPO)规格:96T/48T 74805-92-8麦冬甲基黄烷酮A厂家 Methylophiopogonanone A
化线粒体DNA萃取试剂盒20 15503-87-4光萼野百合碱说明书 Usaramine
RatinhibitorysubunitofNF-κBα,IKBαELISA试剂盒大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA试剂盒规格:96T/48T 156980-60-8罗汉果黄素品牌 Grosvenorine
小鼠早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒 ,英文名: EGR1 ELISA Kit 88901-37-5罗汉果皂苷Ⅲe规格 mogroside Ⅲe
20874-52-6柴胡皂苷D厂家 Saikosaponin D 英文名称RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠1脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)规格:96T/48T
2086-83-1小檗碱厂家 Berberine 英文名称RatPhosphoinositide-3kinaseELISAKit大鼠1脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)规格:96T/48T
20831-76-9龙胆苦苷品牌 Gentiopicroside 英文名称RatPGFElisakit大鼠前列腺素F型(PGF)规格:96T/48T
20784-50-3补骨脂乙素品牌 Isobavachalcone 英文名称RatPGFElisakit大鼠前列腺素F型(PGF)规格:96T/48T
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大肠弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒小鼠周期素依赖性激酶8(CDK8)ELISA试剂盒 ,英文名: CDK8 ELISA Kit 62-46-4硫辛酸说明书 Lipoic acid
犬维生素E(VE)ELISA检测试剂盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T 20831-76-9龙胆苦苷品牌 Gentiopicroside
犬透明质酸(HA)试剂盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 153-18-4芦丁规格 Rutin
英文名称HumaumornecrosisfactorαELISAKIT人肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISAKIT规格:96T/48T 481-72-1芦荟大黄素厂家 Aloeemodin
超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 1415-73-2芦荟苷说明书 Aloin
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程,无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞,高效的保护RNA,又不会影响高效反转录反应,且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒(KR105,TIANGEN),一站式完成从细胞到cDNA的快速制备,同时去除基因组DNA残留,整个操作流程仅需50 min,获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样,冷冻保存供以后使用,是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择,并可实现高通量检测。 图
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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