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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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36
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品名称：无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Anaplasma spp.
产品仅供科研使用分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
中性红质量规格：BSNeutral red Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgM(ai-CMVIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
橙黄Ⅳ质量规格：INDOrange Ⅳ humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T
重水,氧化氘(50G)质量规格：D,99.9%Deuterium Oxide Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA试剂盒人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 人T细胞急性母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
重水,氧化氘(100G)质量规格：D,99.9%Deuterium Oxide 植物乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量检测试剂盒20 兔子S100蛋白(S-100)试剂盒 Rabbit Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit
英文名称MouseAILR1ELISAKIT小鼠AILR1规格：96T/48T 35286-58-9地榆皂苷I品牌 Ziyuglycoside I
肠胃活检螺旋杆菌(H.PYLORI)瓦辛斯泰雷(WahinStarry)银染试剂盒50 35286-59-0地榆皂苷Ⅱ规格 Ziyuglycoside II
RatGelsolinELISA试剂盒大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 482-89-3靛蓝厂家 Indigo
小鼠自身调节因子(AIRE)ELISA试剂盒 ，英文名： AIRE ELISA Kit 479-41-4靛玉红说明书 Indirubin
犬C肽(C-Peptide)ELISA检测试剂盒 96T/48T
551-08-6
丁烯基苯酞品牌 n-Butylidenephthalide
6989-21-5苍术酮厂家 Atractylon 组蛋白脱乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量检测试剂盒20
69884-00-0拟人参皂苷F11厂家 Pseudoginsenoside F11 组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)总活性比色法定量检测试剂盒20
69659-80-9丹参酮IIA-磺酸钠品牌 Tanshinone IIA-sulfonic sodium 组蛋白染色质沉淀(CHIP)分析试剂盒10/20
69659-80-9丹参酮IIA-磺酸钠规格 Sulfotanshinone Sodium Injection 组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性荧光定量检测试剂盒
69363-14-0五味子酚规格 Schisanhenol 组蛋白H4乙酰化检测试剂盒10/20等
无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 32449-98-2Khasianine品牌 Khasianine
小鼠载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 ，英文名： APOC1 ELISA Kit 20316-62-5银椴苷规格 Tiliroside
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA检测试剂盒Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 96T/48T 51938-32-0夏佛塔苷厂家 Schaftoside
犬碱性1酸酶(ALP)试剂盒 Canine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 260413-62-5女贞苷说明书 Ligustroflavone
英文名称HumanAngiopoietin-2ELISAKit人血管生成素-2(ANG-2)规格：96T/48T 113443-70-2大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
规格：Anaplasma spp.
产品仅供科研使用分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
中性红质量规格：BSNeutral red Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgM(ai-CMVIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
橙黄Ⅳ质量规格：INDOrange Ⅳ humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒规格：96T/48T
重水,氧化氘(50G)质量规格：D,99.9%Deuterium Oxide Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA试剂盒人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 人T细胞急性母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
重水,氧化氘(100G)质量规格：D,99.9%Deuterium Oxide 植物乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量检测试剂盒20 兔子S100蛋白(S-100)试剂盒 Rabbit Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit
英文名称MouseAILR1ELISAKIT小鼠AILR1规格：96T/48T 35286-58-9地榆皂苷I品牌 Ziyuglycoside I
肠胃活检螺旋杆菌(H.PYLORI)瓦辛斯泰雷(WahinStarry)银染试剂盒50 35286-59-0地榆皂苷Ⅱ规格 Ziyuglycoside II
RatGelsolinELISA试剂盒大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 482-89-3靛蓝厂家 Indigo
小鼠自身调节因子(AIRE)ELISA试剂盒 ，英文名： AIRE ELISA Kit 479-41-4靛玉红说明书 Indirubin
犬C肽(C-Peptide)ELISA检测试剂盒 96T/48T
6989-21-5苍术酮厂家 Atractylon 组蛋白脱乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量检测试剂盒20
69884-00-0拟人参皂苷F11厂家 Pseudoginsenoside F11 组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)总活性比色法定量检测试剂盒20
69659-80-9丹参酮IIA-磺酸钠品牌 Tanshinone IIA-sulfonic sodium 组蛋白染色质沉淀(CHIP)分析试剂盒10/20
69659-80-9丹参酮IIA-磺酸钠规格 Sulfotanshinone Sodium Injection 组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性荧光定量检测试剂盒
69363-14-0五味子酚规格 Schisanhenol 组蛋白H4乙酰化检测试剂盒10/20等
无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 32449-98-2Khasianine品牌 Khasianine
小鼠载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 ，英文名： APOC1 ELISA Kit 20316-62-5银椴苷规格 Tiliroside
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA检测试剂盒Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 96T/48T 51938-32-0夏佛塔苷厂家 Schaftoside
犬碱性1酸酶(ALP)试剂盒 Canine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 260413-62-5女贞苷说明书 Ligustroflavone
英文名称HumanAngiopoietin-2ELISAKit人血管生成素-2(ANG-2)规格：96T/48T 113443-70-2大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
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文献和实验相关实验
。 2. NTC（无模板阴性对照）出现 CT 值，目的基因的 CT 值还能使用吗？ NTC（无模板阴性对照）出现扩增一般会有两种情况： （1）通过观察融解曲线，NTC 与目的基因融解曲线峰形不重叠。一般 NTC 的 Tm 值较目的基因 Tm 值小。 这种情况下，NTC 的 CT 值是由引物二聚体造成的，并不影响目的基因 CT 值的采集。 （2）NTC 与目的基因融解曲线峰形重叠。NTC 的 Tm 值等于目的基因的 Tm 值。 这种情况下，说明体系已被气溶胶污染了。那么，体系被污染，目的
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。 洗涤技术 如果使用自动洗板机或多通道移液器，请确保进出口能正常运作。 最后一次洗涤后，翻转酶标板倒出多余的洗涤液，并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体自然风干，需立即进行下一步操作。 按照说明书，添加足量的洗涤液至孔内，并保证洗涤完全。 由于洗涤液不是通用的，当试剂盒内的洗涤液用完时，请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要，可联系技术支持寻求帮助。 不要减少或增加洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。 按照说
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