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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
产品名称:转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒价格
运输:低温
保存:负20度
有效期:一年
货期:2-3周
产品及特点 :
转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒 是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转 基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发 了专门用于检测 转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒 的试剂盒,它具有下列特点: 1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。 2. 根据 转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒 保守区域设计引物和探针,能专一性地检测出样品中的 转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒 成分,但不能检测其他非 转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒 成分。 3. 提供阳性对照,便于区分阴性样品。 4. 一管式闭管操作,降低了交叉污染。 5. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。 6. 本只能用于科研,足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。产品仅限科研
使用方法:
一、转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒价格稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲
线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照(用第一步稀释得到的标准曲线系列稀释液的第 4 号做模板)。下面只以定量分析为例描述操作骤。产品仅限科研
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
数据处理 :
11. 如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵
轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的
log 值,再推算出其浓度。
12. 如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等
于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于
30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为
阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则
为阴性,如果小于 40,则为阳性。产品仅限科研
以下是公司正在促销打折产品:
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4)HSP-60( Heat shock protein-60)Bruton酪氨酸激酶抑制剂蛋白抗体
CEAHSP-70 peptideγ干扰素诱导蛋白IP30抗体
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2)alpha Adaptin/AP1中间丝家族孤啡肽1蛋白抗体
Connexin-43(Cx43)ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase )内脏器官发育转位相关蛋白NPH2抗体
Connexin-45(CX45)IDE胰岛素受体β抗体
Anti-Collagen IIIGF-1 R 内皮细胞凝集素HL1抗体
CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1)IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5)干扰素α抗体
COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2)Isulin白介素-17F抗体
转基因元件7S 3‘终止子探针法qPCR试剂盒价格rDen(rh-Dengue Virus) 多价重组人登革热病毒诊断抗原抗坏血酸-6-棕榈酸酯
rDen-2(rh-Dengue Virus) 重组人登革热病毒2型诊断抗原抗坏血酸-6-棕榈酸酯
rSLT/SLT-IIe(O139)(Shiga-Like Toxin Type II Variant) 重组猪水肿素蛋白(细胞因子O139)低聚木糖
ADM (Adrenomedullin)(22-52) 肾上腺髓质素(22-52)低聚木糖
ADM (Adrenomedullin)(22-42) 肾上腺髓质素(22-42)低聚半乳糖
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原)低聚半乳糖
FPP(Fertilization Promoting Peptide) 受精促进肽卫矛醇
多肽产品 多肽产品卫矛醇
ACEI (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor ) 血管紧张素1转换酶抑制剂(抗原)卫矛醇
Acinus peptide ACINUS 多肽抗原卫矛醇
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文献和实验荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域,比如基因的差异表达分析,SNP 检测,等位基因的检测,药物开发,临床诊断,转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中,定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年,美国 PE 公司(已经并入 Invitrogen 公司)成功研制了 Taqman 技术,1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统,通过检测每个循环的荧光强度,通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI
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