Western 印迹是在SDS聚丙烯/酰胺凝胶电泳基础上,将电泳分离的蛋白组分从凝胶转移至一种固相支持物上,应用抗体可与附着于固相支持物上的靶蛋白发生特异性反应的特点,针对特定蛋白进行鉴别和定量。 在Western印迹法中,待测样品溶解于去污剂和还原剂的溶液中,经过SDS聚丙烯/酰胺凝胶电泳后被转移到固相支持物上(常用硝酸纤维素滤膜),然后可被染色。随后滤膜可与抗靶蛋白的一抗反应。最后,结合上的抗体可用多种二级免疫学试剂(与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶偶联的A蛋白或抗免疫球蛋白)检测。Western 印记法可测出1-5ng中等大小的待检蛋白。